細(xì)胞:OVCAR-3細(xì)胞
中文名稱:人卵巢腺癌細(xì)胞
生長特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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干細(xì)胞生物學(xué)研究進(jìn)展
利用實(shí)驗(yàn)鼠的骨髓干細(xì)胞,初步制造出人體下頜骨關(guān)節(jié)。首先從鼠的骨髓中分離出成體間葉干細(xì)胞,并用特定化學(xué)物質(zhì)和生長因子對(duì)干細(xì)胞進(jìn)行處理,使它們分化成能形成骨骼或軟骨的造骨細(xì)胞和軟骨細(xì)胞,然后分別將造骨細(xì)胞和軟骨細(xì)胞與水凝膠聚合物結(jié)合,覆蓋到根據(jù)人體下頜骨關(guān)節(jié)制成的模子上。
將3個(gè)經(jīng)過上述處理的小型模子植入實(shí)驗(yàn)鼠皮膚下,8個(gè)星期后取出模子,發(fā)現(xiàn)它們不僅形成了牢固的結(jié)構(gòu),而且仍然保持著人體下頜骨關(guān)節(jié)的精確立體形狀。更重要的是,測試顯示模子中形成了具有人體骨骼和軟骨特征的新組織。
利用單一種類的成體干細(xì)胞,制造出具有人體骨節(jié)形狀并且包含骨骼和軟骨組織的結(jié)構(gòu),這還是第一次。
這項(xiàng)新研究主要涉及動(dòng)物干細(xì)胞,但研究人員認(rèn)為,這種組織工程技術(shù)有朝一日也許可以用來再生由于疾病等缺損的人體頜部、膝部或髖部骨節(jié)。不過他們也強(qiáng)調(diào),要實(shí)現(xiàn)這個(gè)目標(biāo)還要克服很多挑戰(zhàn),新研究結(jié)果只不過是個(gè)開始。