細(xì)胞:J774A.1細(xì)胞
中文名稱:小鼠單核巨噬細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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造血干細(xì)胞和神經(jīng)干細(xì)胞功能比較專一,但一個(gè)造血干細(xì)胞就能分化繁殖所有的紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板和其它血液成分。【人H4細(xì)胞 來(lái)源:通派細(xì)胞庫(kù) 人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞】干細(xì)胞為什么具有這些神奇的功能。
目前為止,只是通過(guò)干細(xì)胞的行為方式和其表面上的化學(xué)物質(zhì)來(lái)認(rèn)識(shí)干細(xì)胞,而對(duì)形成干細(xì)胞特性的相關(guān)基因基本上一無(wú)所知。【人Saos-2細(xì)胞 來(lái)源:通派細(xì)胞庫(kù) 人骨肉瘤細(xì)胞】如果我們獲得了干細(xì)胞基因的總目錄,就一定會(huì)加快干細(xì)胞的認(rèn)識(shí)過(guò)程,從而揭示干細(xì)胞的作用機(jī)理。
主要研究了干細(xì)胞周圍的細(xì)胞即干細(xì)胞的微環(huán)境?!救薝266B1細(xì)胞 來(lái)源:通派細(xì)胞庫(kù) 人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞】通過(guò)比較干細(xì)胞周圍的干細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞和非滋養(yǎng)細(xì)胞的基因活性,他們發(fā)現(xiàn),有4000多個(gè)基因在干細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞中表現(xiàn)活躍,而在非滋養(yǎng)性細(xì)胞中失去了活性。
以前,我們對(duì)這些周圍細(xì)胞缺乏充分認(rèn)識(shí),但現(xiàn)在我們需要改變思路,應(yīng)該更多地從分子生物學(xué)水平認(rèn)識(shí)它們。這些認(rèn)識(shí)對(duì)干細(xì)胞在藥物開(kāi)發(fā)領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用具有決定性意義。