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IR983F(大鼠骨髓瘤細(xì)胞)

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產(chǎn)品型號

品       牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海市

聯(lián)系方式:宛雙鳳查看聯(lián)系方式

更新時間:2016-11-28 15:57:18瀏覽次數(shù):250次

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經(jīng)營模式:生產(chǎn)廠家

商鋪產(chǎn)品:2985條

所在地區(qū):上海上海市

聯(lián)系人:宛雙鳳 (銷售經(jīng)理)

產(chǎn)品簡介

IR983F(大鼠骨髓瘤細(xì)胞)的處理方法:
1. 先從外包裝盒拿出離心管,在離心管表面噴一層酒精,并小心去掉封口膜;
2. 將離心管中的細(xì)胞在超凈工作臺內(nèi)取出一部分進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)(詳見細(xì)胞凍存)。
3. 如細(xì)胞密度小于3×106/ml,可直接將離心管中的細(xì)胞轉(zhuǎn)移到T25瓶中,置于37°C,5% CO2的培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

詳細(xì)介紹

細(xì)胞名稱:IR983F    大鼠骨髓瘤細(xì)胞

培養(yǎng)條件:RPMI-1640 +10% FBS

形      態(tài):懸?。粓A形

背      景:用于建立大鼠雜交瘤。

IR983F(大鼠骨髓瘤細(xì)胞)“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中,細(xì)胞培增3~6次。細(xì)胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度,即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/100個細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細(xì)胞可達(dá)3~5%。接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進(jìn)行各種試驗。

formazan結(jié)晶的生成量僅與活IR983F(大鼠骨髓瘤細(xì)胞)數(shù)目成正比(死細(xì)胞中琥珀酸脫氫酶消失,不能將MTT還原)。還原生成的formazan結(jié)晶可在含50%的N,N-二甲基甲酰胺和20%的十二甲基磺酸鈉(pH 4.7)的MTT溶解液中溶解,利用酶標(biāo)儀測定490 nm處的光密度OD值,以反映出活細(xì)胞數(shù)目。也可以用DMSO來溶解。MTT粉末和溶液保存時都需要避光,用鋁箔紙包好就可以。實驗的時候一般關(guān)閉超凈臺上的日光燈來避光,覺得這樣比較好。

1.接種:用含10%胎小牛血清得培養(yǎng)液配成單個細(xì)胞懸液,以每孔1000-10000個接種到96孔板,每孔體積200ul.

2.IR983F(大鼠骨髓瘤細(xì)胞)培養(yǎng):同一般培養(yǎng)條件,培養(yǎng)3-5天(可根據(jù)試驗?zāi)康暮鸵鬀Q定培養(yǎng)時間)。

3.呈色:培養(yǎng)3-5天后,每孔加MTT溶液(5mg/ml用PBS 配)20ul.

繼續(xù)孵育4小時,終止培養(yǎng),小心吸棄孔內(nèi)培養(yǎng)上清液,對于懸浮需要離心后再吸棄孔內(nèi)培養(yǎng)上清液。每孔加150ul DMSO,振蕩10分鐘,使結(jié)晶物充分融解。

4.比色:選擇490nm波長,在酶聯(lián)免疫監(jiān)測儀上測定各孔光吸收值,記錄結(jié)果,以時間為橫坐標(biāo),吸光值為縱坐標(biāo)繪制IR983F(大鼠骨髓瘤細(xì)胞)生長曲線。

關(guān)鍵詞:酶標(biāo)儀

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