細(xì)胞名稱：A549/DDP 人肺腺癌耐*株
組織來源：肺癌
培養(yǎng)條件：RPMI-1640 +10% FBS+1-2ug/mlDDP
形 態(tài)：貼壁；上皮細(xì)胞樣
背 景：該細(xì)胞系是1972年由Giard DJ通過肺癌組織移植培養(yǎng)建系的，源自一位58歲的白人男性。A549能通過胞苷二磷脂酰*途徑合成富含不飽和脂肪酸的*；角蛋白陽性。
A549/DDP（人肺腺癌耐*株）“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中，細(xì)胞培增3～6次。細(xì)胞傳代后，一般經(jīng)過三個階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度，即細(xì)胞群的分裂相數(shù)／100個細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2％～0.5％，腫瘤細(xì)胞可達(dá)3～5％。接種2～3天分裂增殖旺盛，是活力時期，稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期)，適宜進(jìn)行各種試驗(yàn)。
formazan結(jié)晶的生成量僅與活A549/DDP（人肺腺癌耐*株）數(shù)目成正比（死細(xì)胞中琥珀酸脫氫酶消失，不能將MTT還原）。還原生成的formazan結(jié)晶可在含50%的N,N-二甲基甲酰胺和20%的十二甲基磺酸鈉（pH 4.7）的MTT溶解液中溶解，利用酶標(biāo)儀測定490 nm處的光密度OD值，以反映出活細(xì)胞數(shù)目。也可以用DMSO來溶解。MTT粉末和溶液保存時都需要避光，用鋁箔紙包好就可以。實(shí)驗(yàn)的時候一般關(guān)閉超凈臺上的日光燈來避光，覺得這樣比較好。
1.接種：用含10％胎小牛血清得培養(yǎng)液配成單個細(xì)胞懸液，以每孔1000－10000個接種到96孔板，每孔體積200ul.
2.培養(yǎng)：同一般培養(yǎng)條件，培養(yǎng)3－5天（可根據(jù)試驗(yàn)?zāi)康暮鸵鬀Q定培養(yǎng)時間）。
3.呈色：培養(yǎng)3－5天后，每孔加MTT溶液（5mg/ml用PBS 配)20ul.
繼續(xù)孵育4小時，終止培養(yǎng)，小心吸棄孔內(nèi)培養(yǎng)上清液，對于懸浮需要離心后再吸棄孔內(nèi)培養(yǎng)上清液。每孔加150ul DMSO，振蕩10分鐘，使結(jié)晶物充分融解。
4.比色：選擇490nm波長，在酶聯(lián)免疫監(jiān)測儀上測定各孔光吸收值，記錄結(jié)果，以時間為橫坐標(biāo)，吸光值為縱坐標(biāo)繪制生長曲線。
KP-N-NS人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞(腦轉(zhuǎn)移)
KU812人外周血嗜堿性白血病細(xì)胞
KURAMOCHI人卵巢癌細(xì)胞
kyse-140人食管癌細(xì)胞
Kyse450人食管癌細(xì)胞
KYSE-510人食管癌細(xì)胞
L78人肺腺鱗癌細(xì)胞
LAX人肺腺癌
LECPα-1人肺癌細(xì)胞
Li-7人肝癌細(xì)胞
lncap人前列腺癌細(xì)胞
LNCaP clone FGC人前列腺癌細(xì)胞
LoVo人結(jié)腸癌細(xì)胞
會員1.png)
