WI38/VA13（SV-40Z轉(zhuǎn)化肺成纖維細胞）

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更新時間：2016-11-28 10:52:41瀏覽次數(shù)：176次

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上海澤葉生物科技有限公司

經(jīng)營模式：生產(chǎn)廠家

商鋪產(chǎn)品：2985條

所在地區(qū)：上海上海市

聯(lián)系人：宛雙鳳（銷售經(jīng)理）

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產(chǎn)品簡介

WI38/VA13（SV-40Z轉(zhuǎn)化肺成纖維細胞）描述：（1）所有細胞株購自ATCC；
（2）公司可提供新鮮或凍存細胞株；
（3）細胞株數(shù)量約 5×105/瓶；
（4）不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌

詳細介紹

細胞名稱：WI38/VA13 SV-40Z轉(zhuǎn)化肺成纖維細胞

培養(yǎng)條件：MEM +10% FBS

形　　態(tài)：貼壁；上皮細胞樣

背　　景：該細胞1964年建系，源自3個月胎齡的女性胚胎的肺成纖維細胞，經(jīng)SV-40轉(zhuǎn)化

WI38/VA13(SV-40Z轉(zhuǎn)化肺成纖維細胞)“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細胞世代或倍增不同。在一代中，細胞培增3～6次。細胞傳代后，一般經(jīng)過三個階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度，即細胞群的分裂相數(shù)／100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2％～0.5％，腫瘤細胞可達3～5％。接種2～3天分裂增殖旺盛，是活力時期，稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期)，適宜進行各種試驗。

formazan結(jié)晶的生成量僅與活WI38/VA13(SV-40Z轉(zhuǎn)化肺成纖維細胞)數(shù)目成正比（死細胞中琥珀酸脫氫酶消失，不能將MTT還原）。還原生成的formazan結(jié)晶可在含50%的N,N-二甲基甲酰胺和20%的十二甲基磺酸鈉（pH 4.7）的MTT溶解液中溶解，利用酶標(biāo)儀測定490 nm處的光密度OD值，以反映出活細胞數(shù)目。也可以用DMSO來溶解。MTT粉末和溶液保存時都需要避光，用鋁箔紙包好就可以。實驗的時候一般關(guān)閉超凈臺上的日光燈來避光，覺得這樣比較好。

1.接種：用含10％胎小牛血清得培養(yǎng)液配成單個細胞懸液，以每孔1000－10000個接種到96孔板，每孔體積200ul.

2.WI38/VA13(SV-40Z轉(zhuǎn)化肺成纖維細胞)培養(yǎng)：同一般培養(yǎng)條件，培養(yǎng)3－5天（可根據(jù)試驗?zāi)康暮鸵鬀Q定培養(yǎng)時間）。

3.呈色：培養(yǎng)3－5天后，每孔加MTT溶液（5mg/ml用PBS 配)20ul.

繼續(xù)孵育4小時，終止培養(yǎng)，小心吸棄孔內(nèi)培養(yǎng)上清液，對于懸浮需要離心后再吸棄孔內(nèi)培養(yǎng)上清液。每孔加150ul DMSO，振蕩10分鐘，使結(jié)晶物充分融解。

4.比色：選擇490nm波長，在酶聯(lián)免疫監(jiān)測儀上測定各孔光吸收值，記錄結(jié)果，以時間為橫坐標(biāo)，吸光值為縱坐標(biāo)繪制WI38/VA13(SV-40Z轉(zhuǎn)化肺成纖維細胞)生長曲線。

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