細(xì)胞名稱：NCI-H460 人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞
組織來(lái)源：肺；轉(zhuǎn)移灶：肋膜滲出癌
培養(yǎng)條件：RPMI-1640 +10% FBS
形 態(tài)：貼壁；上皮細(xì)胞樣
背 景：NCI-H460細(xì)胞株從一位大細(xì)胞肺癌患者的胸水中建立。細(xì)胞表達(dá)的p53 mRNA易于檢測(cè)，其水平與正常肺細(xì)胞相當(dāng)，未表現(xiàn)出DNA總體結(jié)構(gòu)異常。角蛋白和波形蛋白纖維染色陽(yáng)性，神經(jīng)絲三聯(lián)體蛋白陰性
NCI-H460(人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞)“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中，細(xì)胞培增3～6次。細(xì)胞傳代后，一般經(jīng)過(guò)三個(gè)階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度，即細(xì)胞群的分裂相數(shù)／100個(gè)細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2％～0.5％，腫瘤細(xì)胞可達(dá)3～5％。接種2～3天分裂增殖旺盛，是活力時(shí)期，稱指數(shù)增生期(對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期)，適宜進(jìn)行各種試驗(yàn)。
formazan結(jié)晶的生成量?jī)H與活NCI-H460(人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞)數(shù)目成正比（死細(xì)胞中琥珀酸脫氫酶消失，不能將MTT還原）。還原生成的formazan結(jié)晶可在含50%的N,N-二甲基甲酰胺和20%的十二甲基磺酸鈉（pH 4.7）的MTT溶解液中溶解，利用酶標(biāo)儀測(cè)定490 nm處的光密度OD值，以反映出活細(xì)胞數(shù)目。也可以用DMSO來(lái)溶解。MTT粉末和溶液保存時(shí)都需要避光，用鋁箔紙包好就可以。實(shí)驗(yàn)的時(shí)候一般關(guān)閉超凈臺(tái)上的日光燈來(lái)避光，覺(jué)得這樣比較好。
1.接種：用含10％胎小牛血清得培養(yǎng)液配成單個(gè)細(xì)胞懸液，以每孔1000－10000個(gè)接種到96孔板，每孔體積200ul.
2.NCI-H460(人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞)培養(yǎng)：同一般培養(yǎng)條件，培養(yǎng)3－5天（可根據(jù)試驗(yàn)?zāi)康暮鸵鬀Q定培養(yǎng)時(shí)間）。
3.呈色：培養(yǎng)3－5天后，每孔加MTT溶液（5mg/ml用PBS 配)20ul.
繼續(xù)孵育4小時(shí)，終止培養(yǎng)，小心吸棄孔內(nèi)培養(yǎng)上清液，對(duì)于懸浮需要離心后再吸棄孔內(nèi)培養(yǎng)上清液。每孔加150ul DMSO，振蕩10分鐘，使結(jié)晶物充分融解。
4.比色：選擇490nm波長(zhǎng)，在酶聯(lián)免疫監(jiān)測(cè)儀上測(cè)定各孔光吸收值，記錄結(jié)果，以時(shí)間為橫坐標(biāo)，吸光值為縱坐標(biāo)繪制NCI-H460(人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞)生長(zhǎng)曲線。
Hut102人皮膚T細(xì)胞淋巴瘤
IMR-32人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞
Ishikeuva人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞
J82人膀胱移行細(xì)胞癌
JAR人胎盤絨毛癌細(xì)胞
JEC人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞
JEG人絨癌細(xì)胞
JEG-3人絨毛膜癌細(xì)胞
JeKo-1人套細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞
Jurkat人急性T細(xì)胞白血病
Jurkat, Clone E6-1人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞
K562人慢性髓原白血病細(xì)胞
KB人口腔表皮樣癌細(xì)胞
KG1a人髓系白血病細(xì)胞
KM-12人大腸癌細(xì)胞
KM202L人卵巢癌細(xì)胞
KP1人胰腺癌細(xì)胞
KP2人胰腺癌細(xì)胞
KP3人胰腺癌細(xì)胞
KP4人胰腺癌細(xì)胞
KP-N-NS人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞(腦轉(zhuǎn)移)
KU812人外周血嗜堿性白血病細(xì)胞
KURAMOCHI人卵巢癌細(xì)胞
kyse-140人食管癌細(xì)胞
Kyse450人食管癌細(xì)胞
KYSE-510人食管癌細(xì)胞
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