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上海澤葉生物科技有限公司

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了解實(shí)時(shí)熒光定量PCR的一些精髓

閱讀：585發(fā)布時(shí)間：2017-8-4

了解實(shí)時(shí)熒光定量PCR的一些精髓

實(shí)時(shí)熒光定量PCR （Quantitative Real-time PCR）是一種在DNA擴(kuò)增反應(yīng)中，以熒光化學(xué)物質(zhì)測每次聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）循環(huán)后產(chǎn)物總量的方法。通過內(nèi)參或者外參法對(duì)待測樣品中的特定DNA序列進(jìn)行定量分析的方法。

QPCR 的引物一定要確認(rèn)是好的，不能非特異性擴(kuò)增。具體怎么設(shè)計(jì)引物，怎么去檢測，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)該有自己的一套方法，按照實(shí)驗(yàn)室的來做。

樣品加在96孔板的時(shí)候，確認(rèn)量一定要準(zhǔn)確。這個(gè)跟個(gè)人的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)有很大的相關(guān)，跟實(shí)驗(yàn)室的槍有關(guān)系，做這個(gè)實(shí)驗(yàn)是用進(jìn)口的槍，槍一定要主要注意保養(yǎng)，好的槍可以用十幾年的，為了保持?jǐn)?shù)據(jù)的穩(wěn)定性做這些實(shí)驗(yàn)的時(shí)候應(yīng)該選用進(jìn)口頭。

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