本研究構(gòu)建了磨損微粒(wear particles,WP)刺激巨噬細(xì)胞的炎癥反應(yīng)模型,觀察超高分子聚乙烯磨損顆粒(Ultra-high molecular weight polyethylene wear particles,UHMWPE-WP)誘導(dǎo)小鼠單核巨噬細(xì)胞產(chǎn)生炎癥反應(yīng)中炎癥因子,尤其是晚期炎癥蛋白高遷移率族蛋白 B1(high mobility group protein,HMGB1)表達(dá)的影響及可能的機(jī)制,為臨床上人工關(guān)節(jié)無菌性松動的機(jī)制研究提供的理論基礎(chǔ)和實驗依據(jù)。 方法: *部分:磨損微粒誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞炎癥反應(yīng)模型的構(gòu)建 實驗分為三組:①空白組;②模型組(WP 組);③陽性對照組(LPS 組)。 1. MTT 法檢測各分組條件下的細(xì)胞活力。 2. ELISA 法檢測細(xì)胞外周上清液中炎癥因子的含量以分析炎癥反應(yīng)程度。 第二部分:磨損微粒對巨噬細(xì)胞炎癥因子的影響及可能機(jī)制 實驗分為五組動脈粥樣硬化是一種病因復(fù)雜的心血管病變,常累及冠狀動脈、腦動脈、腎動脈、下肢動脈等全身多處血管。動脈粥樣硬化性疾病,如冠心病、腦卒中,是中國人群死亡的主要原因。血管內(nèi)皮細(xì)胞、單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等多種細(xì)胞共同參與動脈粥樣硬化斑塊的發(fā)生發(fā)展,但是眾多研究顯示單核巨噬細(xì)胞可能對斑塊的發(fā)生發(fā)展起著關(guān)鍵性作用[1,2]。故該文對單核巨噬細(xì)胞對動脈粥樣硬化斑塊的發(fā)生發(fā)展進(jìn)行綜述。1內(nèi)膜中脂蛋白的蓄積與修飾雖然動脈粥樣硬化的起始步驟仍存在爭論,但動物實驗結(jié)果提示內(nèi)皮下脂蛋白沉積可能是起始步驟。多種動脈粥樣硬化的危險因素,如高脂血癥、高血壓、高血糖、吸煙等,引起血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷,多為內(nèi)皮細(xì)胞功能性紊亂,可能亦有內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)性損傷[3],損傷的內(nèi)皮細(xì)胞對低密度脂蛋白(low densitylipoprotein,LDL)的通透性增高,導(dǎo)致LDL以穿胞方式通過內(nèi)皮細(xì)胞層,這些LDL與內(nèi)膜下蛋白聚糖結(jié)合,打破LDL進(jìn)出內(nèi)皮細(xì)胞平...林可霉素是一種臨床常用藥,對G+菌及部分厭氧菌有明顯殺菌作用,然而,目前發(fā)現(xiàn)其對機(jī)體整體免疫功能有明顯的抑制作用[1]。本研究針對免疫系統(tǒng)中起關(guān)鍵作用的單核巨噬細(xì)胞進(jìn)行研究,從健康人外周血培養(yǎng)骨髓DC,經(jīng)林可霉素刺激48h,探討其對小鼠DC的表面共刺激分子以及免疫功能的影響。1材料與方法1.1材料及主要試劑健康人外周血來自于20～25歲健康志愿者;人重組M-CSF購自Peprotech,PE標(biāo)記的鼠抗人MHCⅡ(HLA-DR)抗體(同型對照為PE標(biāo)記小鼠IgG2a),PE-鼠抗人CD80(同型對照為PE標(biāo)記小鼠IgG2b),人干擾素-γ(IFN-γ),腫瘤壞死因子α(TNF-α)細(xì)胞因子,ELISA檢測試劑盒均購自美國ebio-science公司;PE標(biāo)記鼠抗人Fas(同型對照為PE標(biāo)記小鼠IgG1)購自美國Biolegend公司;*培養(yǎng)基RPMI1640購自美國hyclone公司;胎牛血清購自Gibco公司。