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蛋白定量檢測服務

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品       牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海

更新時間:2018-08-15 14:21:16瀏覽次數(shù):639次

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蛋白定量檢測服務蛋白定量即蛋白質(zhì)定量,蛋白質(zhì)定量根據(jù)其目的看分為全蛋白質(zhì)的“總定量法"和特定蛋白質(zhì)的“個別定量法"。 [1] 蛋白定量是生物學實驗*的一部分。為驗證細胞裂解是否成功,或為了將多個樣品進行平行實驗比較或標準化保存,需對細胞裂解液進行蛋白定量;為了判定蛋白的產(chǎn)量,需對純化好的蛋白進行定量;為了將純化好的蛋白用生物素或者報告酶進行標記,同樣需首先對蛋白樣品進行定量,以保證標記反應

蛋白定量檢測服務蛋白定量介紹編輯
蛋白質(zhì)的定量分析是生物化學和其他生命學科員常涉及的分析內(nèi)容。在生化實驗中,對樣品中的蛋白質(zhì)進行準確可靠的定量分析,是經(jīng)常進行的一項非常重要的工作。蛋白質(zhì)是一種十分重要的生物大分子,它的種類很多,結(jié)構(gòu)不均一,分子量又相差很大,功能各異,這樣就給建立一個理想而又通用的蛋白質(zhì)定量分析的方法帶來了許多具體的因難。
現(xiàn)測定蛋白質(zhì)含量方法有很多。
① 根據(jù)物理性質(zhì):紫外分光光度法
② 根據(jù)化學性質(zhì):凱氏定氮法、雙縮脲法、Folin-酚試劑法(Lowry法)、BCA法、膠體金法。
③ 根據(jù)染色性質(zhì):考馬斯亮藍染色法、銀染法。
④ 根據(jù)其他性質(zhì):熒光法。 [3] 
蛋白定量分析也就涉及到生產(chǎn)科研的多個領域及行業(yè),也是生物學科、食品檢驗及摻假摻偽、臨床檢驗、診斷疾病和質(zhì)量檢驗中常見的方法。
蛋白定量的測試方法有很多種,其中較為常見的有五種,分別是Bradford法、Bradford斑點試驗、Coomassie 斑點試驗、紫外分光度檢測法及BCA法這五種。當然,每種方法適用的情況都有所不同。 [4] 
Bradford法
該方法用于大多數(shù)蛋白質(zhì)定量是相當精確的,特別是用于小分子多肽定量。如核糖核酸酶或溶菌酶等。但是,去污劑的濃度超過0.2%則影響定量結(jié)果。如TritonX-100,SDS,NP-40等。
Bradford斑點試驗
該方法特別適用于檢測洗脫組分,以定位蛋白洗脫液。例如檢測洗脫液的吸附力的強弱。
Coomassie 斑點試驗
該方法特別適用于檢測洗脫組分以定位蛋白洗脫液。例如檢測洗脫液的吸附力的強弱。
紫外分光度檢測法
蛋白質(zhì)紫外光吸光率是所有的蛋白質(zhì)定量方法中快的方法。通常在280nm光波長下讀數(shù)。其在280nm光波長下的大吸光率主要處決于酪氨酸和色氨酸的存在。在205nm光波長的吸收也常用到。其在205nm光波長下的大吸光率主要處決于肽鏈,盡管氨基酸也有影響。另外,一個主要的優(yōu)點是在測定蛋白質(zhì)濃度時,樣本不會遭到損害。
BCA法
BCA法特點: 1、靈敏度高,檢測濃度下限達到25μg/ml,小檢測蛋白量達到0.5μg,待測樣品體積為1-20μl 。 2、測定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的去污劑等化學物質(zhì)的影響,可以兼容樣品中高達5%的SDS,5%的Triton X-100,5%的Tween 20,60,80。 3、 在20-2000μg/ml濃度范圍內(nèi)有良好的線性關系。 4、 檢測不同蛋白質(zhì)分子的變異系數(shù)遠小于考馬斯亮藍法蛋白定量。 5.、受螯合劑和略高濃度的還原劑的影響:EDTA小于10mM。DTT小于1mM巰基乙醇低于1mm。 [5] 
蛋白定量檢測服務
蛋白測定試劑盒和比色皿:可允許通過修改 Bradford 和 Lowry 方法進行蛋白測量。
分光光度法:bio-rad SmartSpec Plus 是一種紫外/可見分光光度計,適用于多種定量應用。
熒光測定法:臺式 VersaFluor 熒光計可容納支持大范圍激發(fā)和發(fā)射波長的過濾器。 [6]

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