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堿性磷酸酶染色服務(wù) 實(shí)驗(yàn)耗材

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更新時(shí)間:2023-08-25 09:13:44瀏覽次數(shù):714次

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堿性磷酸酶染色服務(wù)堿性磷酸酶較多存在于成熟中性粒細(xì)胞中。在堿性條件下,堿性磷酸酶經(jīng)鎂離子激活后能將磷酸酯水解為磷酸鈉和甘油,磷酸鈉再與氯化鈣、硝酸鈷、硫化銨發(fā)生一系列化學(xué)反應(yīng),生成棕色的硫化鈷定位于胞質(zhì)內(nèi)。

原理

人血液和造血細(xì)胞的堿性磷酸酶pH值為9.4,主要見(jiàn)于中性粒細(xì)胞系的成熟階段或晚幼粒細(xì)胞。在不同生理狀態(tài)和病理狀態(tài)中均有明顯的改變,具有鑒別診斷意義。

 

方法

目前堿性磷酸酶染色法有改良Gomori法及偶氮偶聯(lián)法 (Kaplow)。

改良Gomori法原理為: 細(xì)胞內(nèi)堿性磷酸酶水解試劑中的甘油磷酸鈉釋放出無(wú)機(jī)磷酸鹽,與鈣離子作用生成磷酸鈣,再與鈷離子作用生成磷酸鈷,后與硫化銨生成黑色硫化鈷顆粒,沉淀于細(xì)胞漿中。

偶氮偶聯(lián)法原理為:細(xì)胞中堿性磷酸酶在pH 9.5~9.8的緩沖液中,催化α-磷酸萘酚偶聯(lián)成不溶性有色偶氮染料沉淀于細(xì)胞漿中。

 

結(jié)果解讀

ALP活性僅見(jiàn)于成熟或接近成熟的中性粒細(xì)胞。計(jì)數(shù)100個(gè)中性粒細(xì)胞中陽(yáng)性細(xì)胞數(shù),稱陽(yáng)性率。還可按陽(yáng)性細(xì)胞中的顆粒密度分為1~5級(jí),指數(shù)各為1~5。計(jì)算100個(gè)中性粒細(xì)胞,將每個(gè)細(xì)胞的指數(shù)相加,其總和稱陽(yáng)性指數(shù)或積分,作為判斷酶活性的半定量的指標(biāo)。由于方法及條件的不同,正常差別很大,故每次檢查時(shí)應(yīng)作正常對(duì)照。本法的正常值陽(yáng)性率為60~99%,陽(yáng)性指數(shù)169~367,平均為274。 

臨床意義

臨床上堿性磷酸酶染色法對(duì)以下疾病有鑒別意義:類白血病反應(yīng)顯著增高,慢性粒細(xì)胞白血病 (無(wú)繼發(fā)感染) 顯著減低;急性細(xì)菌感染伴白細(xì)胞增多時(shí),積分顯著升高,病毒性感染時(shí)多正常;真紅細(xì)胞增多癥積分升高,繼發(fā)性紅細(xì)胞增多者則正常,而陣發(fā)性血紅蛋白尿癥則減低;再生障礙性貧血患者明顯升高,淋巴細(xì)胞白血病往往積分升高,但該病成熟的中性粒細(xì)胞較少,較難判斷。 [2]

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