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培養(yǎng)基和試劑
1、營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基
2、10%(m/m)*(Na2S2O3)溶液,一般情況下125ml的采樣瓶加0.1ml,加完后121℃高壓滅菌20min。
操作步驟
1、采樣瓶的要求和預(yù)處理:用于微生物分析的采樣要無酸、無堿、無毒的玻璃容器,采樣瓶在滅菌前加入足量的10%(m/m)*(Na2S2O3)溶液,一般情況下125ml的采樣瓶加0.1ml,加完后121℃高壓滅菌20min。
2、用滅菌吸管吸取均勻水樣1ml,注入到滅菌平皿內(nèi),另取1ml注入另一滅菌平皿內(nèi)作平行接種,取1ml加到9ml無菌生理鹽水中,作1:10稀釋,混勻后取2ml分別加到兩個(gè)無菌平皿內(nèi),每皿1ml。
3、將熔化并冷卻至45℃的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基傾注平皿內(nèi),每皿約15ml,領(lǐng)取一個(gè)不加樣品的平皿作空白對(duì)照,立即旋搖平皿,使水樣和培養(yǎng)充分混勻,待瓊脂凝固后翻轉(zhuǎn)平皿,置36℃±1℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)48h。
菌落計(jì)數(shù)方法
先用肉眼觀察,點(diǎn)數(shù)菌落數(shù),然后再用放大5~10倍的放大鏡檢查,以防遺漏。記下各平皿的菌落數(shù)后,求出同一稀釋度各平皿生長的平均菌落數(shù),若平皿中有連成片狀的菌落或花點(diǎn)樣菌落蔓延生長時(shí),菌落計(jì)數(shù)后乘以2,所得結(jié)果代表全皿菌落數(shù)。
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