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兔β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)elisa試劑盒

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更新時間:2018-03-20 04:07:10瀏覽次數(shù):268次

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兔β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)elisa試劑盒浸泡式洗滌: 

洗滌在ELISA過程中雖不是一個反應步驟,但卻也決定著實驗的成敗。ELSIA就是靠洗滌來達到分離游離的和結合的酶標記物的目的。通過洗滌以清除殘留在 板孔中沒能與固相抗原或抗體結合的物質(zhì),以及在反應過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。聚苯乙烯等塑料對蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的,而在洗滌時又應 把這種非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來??梢哉f在ELISA操作中,洗滌是zui主要的關鍵技術,應引起操作者的高度重視,操作者應嚴格按要求洗滌,不得馬虎。 

洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動洗滌儀外,手工操作有浸泡式,過程如下: 

浸泡式 a.吸干或甩干孔內(nèi)反應液;b.用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去);c.浸泡,即將洗滌液注滿板孔,放置1-2分鐘,間歇搖動,浸泡時間不 可隨意縮短;d.吸干孔內(nèi)液體。吸干應*,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干;e.重復操作c和d,洗滌3-4次(或按說 明規(guī)定)。在間接法中如本底較高,可增加洗滌次數(shù)或延長浸泡時間。 

微量滴定板多采用浸泡式洗滌法。洗滌液多為含非離子型洗滌劑的中性緩沖液。聚 苯乙烯載體與蛋白質(zhì)的結合是疏水性的,非離子型洗滌劑既含疏水基團,也含親水基團,其疏水基團與蛋白質(zhì)的疏水基團借疏水鍵結合,從而削弱蛋白質(zhì)與固相載體 的結合,并借助于親水基團和水分子的結合作用,使蛋白質(zhì)回復到水溶液狀態(tài),從而脫離固相載體。洗滌液中的非離子型洗滌劑一般是吐溫20,其濃度可在 0.05%-0.2%之間,高于0.2%時,可使包被在固相上的抗原或抗體解吸附而減低試驗的靈敏度。 

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