研究小組近日撤回了一篇關(guān)于microRNA（miRNA）衰減的文章，因?yàn)樗齻儼l(fā)現(xiàn)，所用的TRIzol試劑會(huì)對(duì)富含GC的miRNA或具二級(jí)結(jié)構(gòu)的miRNA產(chǎn)生不同影響。 研究人員發(fā)現(xiàn)，一旦細(xì)胞粘附性喪失，某些miRNA迅速降解。當(dāng)他們以低密度培養(yǎng)細(xì)胞或用*或EGTA解離細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞內(nèi)成熟miR-141表達(dá)水平顯著下降，而來自同一個(gè)轉(zhuǎn)錄本（pri-miR-200c~141）的miR-200c不受影響。當(dāng)細(xì)胞解離時(shí)，*對(duì)轉(zhuǎn)錄的阻斷導(dǎo)致miR-141的迅速耗盡，半衰期不到1小時(shí)，從而表明miR-141是通過高速衰減而導(dǎo)致表達(dá)水平發(fā)生迅速改變的。在進(jìn)一步的研究中，研究人員通過其他的miRNA包括miR-200a, miR-34a, miR-29b, miR-301a, 和 miR-21再次驗(yàn)證了這一調(diào)控機(jī)制.然而，Narry Kim研究小組近日撤回了該文章。她們?cè)诔坊芈暶髦袑懙溃?ldquo;基于我們的結(jié)果，我們認(rèn)為，一些miRNA會(huì)根據(jù)細(xì)胞的粘附狀態(tài)而選擇性喪失穩(wěn)定性。然而，在后續(xù)研究中，我們發(fā)現(xiàn)，低GC含量的miRNA（如miR-141、miR-29b、miR-21、miR-106b、miR-1和miR-34a）會(huì)在樣品制備階段選擇性丟失，而不是在細(xì)胞中降解。”

    此外，Kim及她的同事還發(fā)表了新的數(shù)據(jù)，將TRIzol RNA分離方法與另一種不太常用的mirVana方法進(jìn)行了比較，應(yīng)用在高密度和低密度細(xì)胞樣品上。利用TRIzol，她們發(fā)現(xiàn)，低密度培養(yǎng)物中的miR-141水平低于高密度培養(yǎng)物。然而，利用mirVana方法，兩者只有輕微的差異。作者認(rèn)為，兩個(gè)操作步驟的數(shù)據(jù)不一致提出了一個(gè)嚴(yán)重的問題，即某些miRNA可能在RNA制備過程中丟失，這取決于選擇的操作步驟。 Kim談道：“科學(xué)家不可避免地會(huì)承認(rèn)一些假設(shè)，而它們后來被證明是錯(cuò)誤的。我們也存在一些技術(shù)限制，而在研究的時(shí)候未被發(fā)現(xiàn)。因此，得出錯(cuò)誤的結(jié)論有時(shí)是不可避免的。zui重要的是要誠實(shí)，一旦我們意識(shí)到，就要糾正錯(cuò)誤。”

    對(duì)于miRNA的分離，很多實(shí)驗(yàn)室都是使用TRIzol試劑。但從這篇文章的結(jié)論來看，TRIzol很可能會(huì)影響部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果。吸取Narry Kim的教訓(xùn)，大家還是采用兩種分離方法，來驗(yàn)證結(jié)果的可靠性。同時(shí)，希望Life Tech的研發(fā)部門好好研究一下，發(fā)布更為可靠的操作步驟。

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