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上海滬宇生物科技有限公司

酶聯(lián)免疫試劑盒步驟

時(shí)間:2015-1-22閱讀:323
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酶聯(lián)免疫試劑盒操作步驟
1 確定本次檢測(cè)所需的已包被抗體的酶標(biāo)板孔數(shù)目。
2 將倍比稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品各0.1ml依次加入一排7孔中,1孔只加樣品稀釋液的作為對(duì)照。處理后的標(biāo)本按100ul每孔加入。
3 酶標(biāo)板加上蓋,37℃反應(yīng)90分鐘。
4 反應(yīng)后用自動(dòng)洗板機(jī)吸去酶標(biāo)板內(nèi)的液體;或甩去酶標(biāo)板內(nèi)液體,再對(duì)著吸水紙拍幾下。洗滌2次。
5 將準(zhǔn)備好的*抗體工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反應(yīng)60分鐘。
6 0.01M TBS0.01M PBS洗滌3次,每次浸泡1分鐘左右。
7 將準(zhǔn)備好的ABC工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反應(yīng)30分鐘。
8 0.01M TBS0.01M PBS洗滌5次,每次浸泡1-2分鐘左右。
9 按每孔0.1ml依次加入TMB顯色工作液,37℃避光反應(yīng),反應(yīng)過(guò)程中,要經(jīng)常的觀察,當(dāng)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有    明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔差別不明顯時(shí),即可加入TMB終止液0.1ml/孔。(顯色反應(yīng)zui長(zhǎng)不要超過(guò)30分鐘)。
10 用酶標(biāo)儀在450nm測(cè)定O.D.值。
11 根據(jù)樣品的吸光值在坐標(biāo)上找出對(duì)應(yīng)的濃度。用戶也可以使用各種應(yīng)用軟件來(lái)計(jì)算。應(yīng)記住由于樣品稀釋了N倍,其實(shí)際濃度應(yīng)該×N。

Elisa試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)分析方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便,結(jié)果判斷較客觀等因素, 已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)科研實(shí)驗(yàn)的各領(lǐng)域中。 本司產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于其他用途! 


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