P19-CAG-tTA-1F3細(xì)胞保存幾大步驟

　　1. P19-CAG-tTA-1F3細(xì)胞液體培養(yǎng)基的保存是冷藏好？還是冷凍好？

　　要冷藏??！因?yàn)橐后w培養(yǎng)基經(jīng)冷凍后再經(jīng)溶化時(shí)，其溶液的pH值會(huì)發(fā)生改變，溶液往往變堿，某些成分溶解也會(huì)受到影響對(duì)細(xì)胞生長不利。故液體培養(yǎng)基一定要存放在冷藏箱中，通常液體培養(yǎng)基在冷藏條件下可存放6個(gè)月 ~ 一年。

　　2.P19-CAG-tTA-1F3細(xì)胞 液體培養(yǎng)基中的作用，及使用方法。

　　新wen速遞：讓細(xì)胞“百毒不侵”,人類基因組編寫計(jì)劃轉(zhuǎn)向設(shè)計(jì)“超安全”細(xì)胞。早在2016年，美國紐約大學(xué)的杰夫·博伊科、哈佛大學(xué)的喬治·邱奇、耶魯大學(xué)生物工程師法瑞恩·艾薩克等的科學(xué)家在美國《科學(xué)》雜志上刊文宣布，將籌資1億美元，啟動(dòng)歷時(shí)10年的人類基因組編寫計(jì)劃（GP-write），從頭開始在實(shí)驗(yàn)室中合成出人類基因組。消息一經(jīng)發(fā)布，就引發(fā)了科學(xué)界和公眾對(duì)于實(shí)驗(yàn)室“合成”出人類的強(qiáng)烈擔(dān)憂。但在歷時(shí)兩年的喧嘩與sao動(dòng)后，該項(xiàng)目小組5月1日在波士頓宣布，將暫時(shí)放棄從頭制造人類基因組的嘗試，專注于編輯細(xì)胞以對(duì)抗病毒感染。
　　P19-CAG-tTA-1F3細(xì)胞，上海拜力生物公司細(xì)胞近3000種，來源于美國ATCC,細(xì)胞都是經(jīng)過嚴(yán)格質(zhì)量控制，在中國大陸努力搭建正牌細(xì)胞與國內(nèi)廣大科研人員之間的溝通橋梁。為您提供P19-CAG-tTA-1F3細(xì)胞外，還有更多相關(guān)實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品，標(biāo)準(zhǔn)品，細(xì)胞株和實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)等等前期后續(xù)服務(wù)。

　　幾乎所有的細(xì)胞對(duì)有較高的要求，細(xì)胞需要合成蛋白質(zhì)，在缺少時(shí)，細(xì)胞生長不良而死亡。所以，各種培養(yǎng)液中都含有較大量的。在溶液中很不穩(wěn)定，應(yīng)置-20 ?C冰凍保存，用前加入培養(yǎng)基中。加有的液體培養(yǎng)基4 ?C 冰箱儲(chǔ)存兩周以上時(shí)，應(yīng)重新加入原來量的?；A(chǔ)醫(yī)學(xué)細(xì)胞中心在其服務(wù)項(xiàng)目中配制分裝了高濃度（100倍）的溶液（1ml/支）。每支1ml的加到99ml*培養(yǎng)基中，其終濃度為2mM/ml培養(yǎng)基。包裝為粉紅色，-24?C保存。

　　3. P19-CAG-tTA-1F3細(xì)胞 培養(yǎng)用液pH對(duì)細(xì)胞生長的影響

　　由于，大多數(shù)細(xì)胞適宜pH為7.2~7.4，偏離此范圍對(duì)細(xì)胞將產(chǎn)生有害的影響。各種細(xì)胞對(duì)pH的要求也不*相同，原代培養(yǎng)細(xì)胞一般對(duì)pH變動(dòng)耐受差，無限細(xì)胞系耐受力強(qiáng)。

　　但總體來說，細(xì)胞耐酸性比耐堿性強(qiáng)一些，偏酸環(huán)境中更利于細(xì)胞生長。因此，我們?cè)谂渲婆囵B(yǎng)用液時(shí)，可把液體的pH稍微調(diào)得偏酸一些。液體在經(jīng)過0.10um或0.22um濾膜過濾時(shí)，溶液的pH還會(huì)向上浮動(dòng)0.2左右。

　　4.P19-CAG-tTA-1F3細(xì)胞 細(xì)胞傳代消化時(shí)所用濃度越高越好嗎？

　　不見得！因?yàn)槿芤旱南芰κ呛腿芤旱膒H、溫度、濃度及溶液中是否含有Ca++, Mg++離子和血清等因素有關(guān)。通常情況下，pH 8.0 , 溫度 37 oC 其作用能力zui強(qiáng)。另外，鈣、鎂離子及血清均能大大降低其消化能力。我們每次進(jìn)行傳代消化前，一定要用D-Hanks液或PBS液反復(fù)沖洗細(xì)胞培養(yǎng)瓶，以便于將含血清的培養(yǎng)基沖洗干凈，這樣就能大大提高消化液的消化能力。本中心通常使用的消化液濃度為：

　?。?）０.０５％＋０.０２％ＥＤＴＡ；

　?。?）０.２５％＋０.０３％ＥＤＴＡ。

　　（3）0.25%

　　溶液ｐＨ８.０～９.０；使用Ｄ－Ｈａｎｋ液配制。

　　多數(shù)細(xì)胞傳代消化可使用０.０５％＋０.０２％ＥＤＴＡ這種消化液。　

　　（編輯：tanxi）