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RPMI-8226/IL15細(xì)胞的選擇及培養(yǎng)技巧

時(shí)間:2018-5-4閱讀:854

 RPMI-8226/IL15細(xì)胞的選擇及培養(yǎng)技巧

  1. RPMI-8226/IL15細(xì)胞液體培養(yǎng)基的保存是冷藏好?還是冷凍好?

  要冷藏??!因?yàn)橐后w培養(yǎng)基經(jīng)冷凍后再經(jīng)溶化時(shí),其溶液的pH值會(huì)發(fā)生改變,溶液往往變堿,某些成分溶解也會(huì)受到影響對細(xì)胞生長不利。故液體培養(yǎng)基一定要存放在冷藏箱中,通常液體培養(yǎng)基在冷藏條件下可存放6個(gè)月 ~ 一年。

  2.RPMI-8226/IL15細(xì)胞 液體培養(yǎng)基中的作用,及使用方法。

  新wen速遞:讓細(xì)胞“百毒不侵”,人類基因組編寫計(jì)劃轉(zhuǎn)向設(shè)計(jì)“超安全”細(xì)胞。早在2016年,美國紐約大學(xué)的杰夫·博伊科、哈佛大學(xué)的喬治·邱奇、耶魯大學(xué)生物工程師法瑞恩·艾薩克等的科學(xué)家在美國《科學(xué)》雜志上刊文宣布,將籌資1億美元,啟動(dòng)歷時(shí)10年的人類基因組編寫計(jì)劃(GP-write),從頭開始在實(shí)驗(yàn)室中合成出人類基因組。消息一經(jīng)發(fā)布,就引發(fā)了科學(xué)界和公眾對于實(shí)驗(yàn)室“合成”出人類的強(qiáng)烈擔(dān)憂。但在歷時(shí)兩年的喧嘩與sao動(dòng)后,該項(xiàng)目小組5月1日在波士頓宣布,將暫時(shí)放棄從頭制造人類基因組的嘗試,專注于編輯細(xì)胞以對抗病毒感染。
  RPMI-8226/IL15細(xì)胞,上海拜力生物公司細(xì)胞近3000種,來源于美國ATCC,細(xì)胞都是經(jīng)過嚴(yán)格質(zhì)量控制,在中國大陸努力搭建正牌細(xì)胞與國內(nèi)廣大科研人員之間的溝通橋梁。為您提供RPMI-8226/IL15細(xì)胞外,還有更多相關(guān)實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品,標(biāo)準(zhǔn)品,細(xì)胞株和實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)等等前期后續(xù)服務(wù)。

  幾乎所有的細(xì)胞對有較高的要求,細(xì)胞需要合成蛋白質(zhì),在缺少時(shí),細(xì)胞生長不良而死亡。所以,各種培養(yǎng)液中都含有較大量的。在溶液中很不穩(wěn)定,應(yīng)置-20 ?C冰凍保存,用前加入培養(yǎng)基中。加有的液體培養(yǎng)基4 ?C 冰箱儲(chǔ)存兩周以上時(shí),應(yīng)重新加入原來量的?;A(chǔ)醫(yī)學(xué)細(xì)胞中心在其服務(wù)項(xiàng)目中配制分裝了高濃度(100倍)的溶液(1ml/支)。每支1ml的加到99ml*培養(yǎng)基中,其終濃度為2mM/ml培養(yǎng)基。包裝為粉紅色,-24?C保存。

  3. RPMI-8226/IL15細(xì)胞 培養(yǎng)用液pH對細(xì)胞生長的影響

  由于,大多數(shù)細(xì)胞適宜pH為7.2~7.4,偏離此范圍對細(xì)胞將產(chǎn)生有害的影響。各種細(xì)胞對pH的要求也不*相同,原代培養(yǎng)細(xì)胞一般對pH變動(dòng)耐受差,無限細(xì)胞系耐受力強(qiáng)。

  但總體來說,細(xì)胞耐酸性比耐堿性強(qiáng)一些,偏酸環(huán)境中更利于細(xì)胞生長。因此,我們在配制培養(yǎng)用液時(shí),可把液體的pH稍微調(diào)得偏酸一些。液體在經(jīng)過0.10um或0.22um濾膜過濾時(shí),溶液的pH還會(huì)向上浮動(dòng)0.2左右。

  4.RPMI-8226/IL15細(xì)胞 細(xì)胞傳代消化時(shí)所用濃度越高越好嗎?

  不見得!因?yàn)槿芤旱南芰κ呛腿芤旱膒H、溫度、濃度及溶液中是否含有Ca++, Mg++離子和血清等因素有關(guān)。通常情況下,pH 8.0 , 溫度 37 oC 其作用能力zui強(qiáng)。另外,鈣、鎂離子及血清均能大大降低其消化能力。我們每次進(jìn)行傳代消化前,一定要用D-Hanks液或PBS液反復(fù)沖洗細(xì)胞培養(yǎng)瓶,以便于將含血清的培養(yǎng)基沖洗干凈,這樣就能大大提高消化液的消化能力。本中心通常使用的消化液濃度為:

 ?。?)0.05%+0.02%EDTA;

  (2)0.25%+0.03%EDTA。

 ?。?)0.25%

  溶液pH8.0~9.0;使用D-Hank液配制。

  多數(shù)細(xì)胞傳代消化可使用0.05%+0.02%EDTA這種消化液。 

  (編輯:tanxi)

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