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規(guī)格	5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶	組織來源	卵巢組織
貨號	CS-X3292	細(xì)胞形態(tài)	成纖維細(xì)胞樣

產(chǎn)品信息：

貨號	CS-X3292	組織來源	卵巢組織
傳代特性	可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)	培養(yǎng)基	含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
細(xì)胞形態(tài)	成纖維細(xì)胞樣	生長特性	貼壁
培養(yǎng)條件	氣相：空氣，95%；CO2，5%	換液頻率	每2-3天換液一次

大鼠卵泡膜細(xì)胞

商品介紹：

產(chǎn)品名稱：大鼠卵泡膜細(xì)胞
2.組織來源：卵巢組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡介：

大鼠卵泡膜細(xì)胞分離自卵巢組織；卵巢是雌性動物的生殖器官，卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同，僅左側(cè)發(fā)育（右側(cè)已退化），呈葡萄狀，均為處于不同發(fā)育時期的卵泡，卵泡呈黃色，卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產(chǎn)卵期有關(guān)。大多數(shù)脊椎動物有兩個卵巢，但是部分魚類的兩個卵巢融合為單個結(jié)構(gòu)，而所有鳥類只有左側(cè)卵巢有機(jī)能。卵巢是位于子宮兩側(cè)的一對卵圓形的生殖器官，它的外表有一層上皮組織，其下方有薄層的結(jié)締組織。卵巢的內(nèi)部結(jié)構(gòu)可分為皮質(zhì)和髓質(zhì)。皮質(zhì)位于卵巢的周圍部分，主要由卵泡和結(jié)締組織構(gòu)成；髓質(zhì)位于中央，由疏松結(jié)締組織構(gòu)成，其中有許多血管、淋巴管和神經(jīng)。哺乳動物的卵巢內(nèi)卵泡的發(fā)育需要相關(guān)激素的調(diào)節(jié)才能完成，垂體促性腺激（卵泡刺激素和黃體生成素）使原始卵泡開始發(fā)育，其過程中還產(chǎn)生大量的雌激素。雌激素是卵巢的顆粒細(xì)胞和卵泡膜細(xì)胞在垂體促性腺激的作用下協(xié)同合成的，卵泡膜細(xì)胞合成的雄激素透過基膜進(jìn)入顆粒細(xì)胞，并轉(zhuǎn)變?yōu)榇萍に?。因此，卵泡膜?xì)胞在生殖內(nèi)分泌調(diào)節(jié)中占有關(guān)鍵的位置，了解其在病理及生理中的作用，對于與性激素有關(guān)的婦產(chǎn)科疾?。ㄈ缍嗄衣殉簿C合癥、卵巢癌等）的研究有著重要意義。在哺乳動物卵泡生長發(fā)育的過程中，卵母細(xì)胞由不斷增加的顆粒細(xì)胞層包裹。卵巢組織中的膜細(xì)胞作為卵泡的外層細(xì)胞可以維持卵泡結(jié)構(gòu)的完整性，參與構(gòu)成卵母細(xì)胞和顆粒細(xì)胞發(fā)育的微環(huán)境且為類固醇激素的生成提供底物。在哺乳動物中調(diào)節(jié)膜細(xì)胞類固醇激素生成的機(jī)制已見相關(guān)報道，但是有關(guān)卵泡膜細(xì)胞的聚集、生長和分化的研究尚不深入。

5.方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠卵泡膜細(xì)胞采用膠原酶消化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的大鼠卵泡膜細(xì)胞經(jīng)3β-HSD免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

細(xì)胞保存方法：

（一）細(xì)胞凍存

1. 配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液；

2. 取對數(shù)生長期的細(xì)胞，去除舊培養(yǎng)液，用PBS清洗。

3. 去除PBS，加入適量（覆蓋培養(yǎng)皿表面）把單層生長的細(xì)胞消化下來；

4. 離心1000rpm，5min；

5. 去除，加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，計數(shù)，調(diào)節(jié)凍存液中細(xì)胞的最終密度為5×106/ml～1×107/ml；

6. 將細(xì)胞分裝入凍存管中，每管1～1.5 ml；

7. 在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱，凍存時間及操作者；

8. 凍存：標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序為降溫速率-1～-2℃/ min；當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃時，則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細(xì)胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ，然后放入-70℃冰箱中過夜，取出凍存管，移入液氮容器內(nèi)。

大鼠卵泡膜細(xì)胞

注意事項：

1）、欲冷凍保存之細(xì)胞應(yīng)在生長良好且存活率高之狀態(tài)，約為80～90%致密度。冷凍前檢測細(xì)胞是否仍保有其性質(zhì)，應(yīng)在冷凍保存前一至二日測試是否有抗體之產(chǎn)生。

2）、細(xì)胞在液氮中可長期凍存無，而不會影響細(xì)胞活力;在-70度可保存數(shù)月。

3）、注意冷凍保護(hù)劑之品質(zhì)。DMSO應(yīng)為試劑級等級，無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產(chǎn)品，如Sigma D-2650)，以5～10 ml小體積分裝，4 ℃避光保存，勿作多次解凍。Glycerol亦應(yīng)為試劑級等級，以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用，因長期儲存后對細(xì)胞會有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液，可避免DMSO直接加入時釋放的熱量對細(xì)胞的損傷。緩慢逐滴加入細(xì)胞懸液是使細(xì)胞逐步適應(yīng)高滲，可降低細(xì)胞受損。DMSO可能引起部分白血病細(xì)胞株的分化，可換用10%甘油凍存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠棕色脂肪干細(xì)胞	人端粒重復(fù)序列結(jié)合因子1(TERF1)試劑盒ELISA
人胎盤絨毛膜細(xì)胞	人基質(zhì)裂解su(ST3)試劑盒ELISA
小鼠子宮平滑肌細(xì)胞	人超敏熱休克蛋白60(HSP-60)ELISA檢測試劑盒
大鼠子宮平滑肌細(xì)胞	人αS轉(zhuǎn)移mei(α-GST)ELISA Kit
兔肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞	禽白血病病毒K亞群RT-PCR試劑盒
人子宮平滑肌細(xì)胞	腦多頭囊蟲PCR檢測試劑盒
小鼠卵巢上皮細(xì)胞	口蹄疫病毒A型(FMDV-A)核suan檢測試劑盒
大鼠卵巢上皮細(xì)胞	胡桃PCR檢測試劑盒
兔成骨細(xì)胞	馬輪狀病毒RT-PCR試劑盒
人子宮成纖維細(xì)胞	禽白血病病毒F亞群RT-PCR試劑盒
小鼠子宮成纖維細(xì)胞	侵肺巴斯德菌PCR試劑盒
兔肌腱成纖維細(xì)胞	馬生殖泰勒氏菌PCR檢測試劑盒
大鼠子宮成纖維細(xì)胞	大鼠卵泡膜細(xì)胞馬流產(chǎn)沙門氏菌PCR檢測試劑盒
人卵巢上皮細(xì)胞	茄病鐮刀菌PCR檢測試劑盒
小鼠卵巢成纖維細(xì)胞	傳染性對蝦皮下和造血器官壞死病毒(IHHNV)核suan檢測試劑盒

操作步驟：

1）、冷凍前24-48小時更換半量或全量培養(yǎng)基，使細(xì)胞處于指數(shù)生長期。

2）、配制冷凍保存溶液(使用前配制)：另取一離心管，加入培養(yǎng)基、血清，逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度，即制成雙倍的凍存液，置于室溫下待用。

3）、離心收集培養(yǎng)之細(xì)胞，用加血清的培養(yǎng)基重懸起細(xì)胞，取少量細(xì)胞懸浮液(約0. 1 ml)計數(shù)細(xì)胞濃度及凍前存活率。

4）、取與細(xì)胞懸液等量的凍存液，緩慢逐滴加入細(xì)胞懸液，并晃動試管，制成細(xì)胞凍存懸液(DMSO后濃度為5～10%)，使細(xì)胞濃度為1～5×106cells/ ml，混合均勻，分裝于已標(biāo)示之冷凍保存管中，1～2 ml/vial，并取少量細(xì)胞懸浮液作污染檢測。嚴(yán)密封口后，注明細(xì)胞名稱、代數(shù)、日期。然后進(jìn)行凍存。