腸出血性大腸桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒

英文名稱：Enterohemorrhagic E. coli(EHEC)
型號：CSP916658

規(guī)格：50T

分類：探針法熒光定量PCR試劑盒

儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

運輸：低溫、避光。

有效期：一年

規(guī)格及成分：

PCR檢測試劑盒流程示意圖：

【結(jié)果分析條件設(shè)定】

u 基線（Baseline）設(shè)定：應(yīng)選擇該次實驗指數(shù)擴增前所有樣本熒光信號比較穩(wěn)定的一段區(qū)域（所有樣本熒光信號無較大波動），起始點（Start）應(yīng)避開熒光采集起始階段的信號波動，終止點（End）應(yīng)比早出現(xiàn)指數(shù)擴增的樣本Ct值減少1~3個循環(huán)，建議基線設(shè)為6~15。

u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾值線設(shè)定在剛好超過正常陰性質(zhì)控品擴增曲線的高點。

實驗操作：

1. 模板制備（樣本制備區(qū)）

建議使用配套水生動物病害基因組 DNA/RNA 提取試劑盒系列產(chǎn)品，具體過程詳見產(chǎn)品說明書。

2．添加模板（模板添加區(qū)，放置于冰盒中進行）

請于-20℃條件下保存，有效期 12 個月

取出所需測試數(shù)的已含有反應(yīng)液 A-TSV-I 的 PCR 管，將試劑解凍，離心 30 秒，在管蓋上標(biāo)記管名（陰性對照管 NG、樣品 XX、陽性對照管 PG）。打開管蓋向各管管底分別加入 0.8μL B-I 及 0.2μL R-I，蓋上陰性對照管管蓋，其他各管分別沿管壁加入 2μL 模板，順序為待測樣品模板、PG-TSV-I，依次蓋好各管管蓋，離心 30 秒，立即進行擴增反應(yīng)。

3. 擴增反應(yīng)（擴增及產(chǎn)物分析區(qū)）

①恒溫儀器 63℃條件下反應(yīng) 60 min。待儀器升溫至 63℃后，新建程序，設(shè)置實驗名稱及反應(yīng)時間，將步驟 2中離心后的 PCR 反應(yīng)管放入恒溫?zé)晒夥肿訖z測儀，點擊開始檢測。

②若使用熒光定量 PCR 儀，則熒光基團選擇 FAM，淬滅基團選擇 None，將 63℃ 15 s，63℃ 45 s 作為一個循環(huán)，于 63℃ 45 s 處收集熒光信號，60 個循環(huán)。

其他儀器請參照儀器說明書進行設(shè)置。

【質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)】

1.   陰性質(zhì)控品的檢測結(jié)果應(yīng)為陰性，無指數(shù)擴增期，Ct=40或無Ct；

2.   陽性質(zhì)控品的檢測結(jié)果應(yīng)為陽性，有明顯的指數(shù)擴增期，Ct值應(yīng)小于等于35；

3.   以上要求需在一次實驗中同時滿足，否則該次實驗視為無效。

本產(chǎn)品僅供科學(xué)實驗研究使用! 不能用于臨床或動物診斷！

公司正在出售的產(chǎn)品：