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貨號 | CS-C6272 | 貨期 | 1~3天 |
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規(guī)格 | 50T|100T | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
Annexin V-APC/7-AAD細胞凋亡檢測試劑盒細胞凋亡是細胞的基本特征之一,它在機體的胚胎發(fā)育、組織修復、內環(huán)境的穩(wěn)定和一些疾病發(fā)生過程等方面起著十分重要的作用。
在正常細胞中,磷脂酰絲氨(PS)只分布在細胞膜脂質雙層的內側,而在細胞凋亡早期,細胞膜中的磷脂酰絲氨(PS)由脂膜內側翻向外側。在體內,巨噬細胞可以識別翻轉到細胞膜表面的PS 從而將這些程序性死亡的細胞清除,因此凋亡過程中并不伴隨局部的炎癥反應,而在細胞壞死的過程中則常常伴隨著炎癥反應。
AnnexinⅤ是一種分子量為35-36kD的Ca2+依賴性磷脂結合蛋白,能與細胞凋亡過程中翻轉到膜外的PS 高親和力特異性結合。PS 外翻發(fā)生在細胞核破裂,DNA 片段化以及凋亡相關蛋白出現之前,這使得Annexin V 與PS的結合成為凋亡早期的一種重要檢測標志事件。
檢測原理:
在正常的活細胞中,磷脂酰絲氨(phosphotidylserine,PS)位于細胞膜的內側,但在早期凋亡的細胞中,PS 從細胞膜的內側翻轉到細胞膜的表面,暴露在細胞外環(huán)境中。
Annexin-Ⅴ能與PS 高親和力結合??赏ㄟ^細胞外側暴露的磷脂酰絲氨與凋亡早期細胞的胞膜結合。用標記了APC的AnnexinⅤ作為熒光探針,利用流式細胞儀或熒光顯微鏡可檢測細胞凋亡的發(fā)生。細胞壞死的過程中也會發(fā)生細胞膜損傷,壞死的細胞會結合Annexin V-APC。
Annexin V-APC 通常與細胞膜非滲透性核酸熒光染料聯(lián)合使用以檢測凋亡細胞。常用的染料是7-AAD。正常細胞和早期凋亡細胞的細胞膜是完整的,核酸染料7-AAD 不能透過完整的細胞膜,但在凋亡中晚期的細胞和壞死細胞,7-AAD 能夠透過細胞膜與細胞核結合呈現紅色。
7-AAD/Annexin V-APC試劑盒將Annexin Ⅴ與7-AAD匹配使用,可以將凋亡早期的細胞和晚期的細胞以及死細胞區(qū)分開來。壞死細胞可以同時與Annexin V-APC和7-AAD 結合顯色,而7-AAD 則被排除在活細胞(APC陰性)和早期凋亡細胞(APC陽性)之外。在沒有巨噬細胞的情況下,凋亡的最后階段會像細胞壞死一樣發(fā)生整個細胞的解體,從而使凋亡晚期的細胞也同時被APC和7-AAD 結合染色呈現雙陽性。
儲存條件:染色液2-8℃避光保存;結合液2-8℃保存;長期不用-20℃保存。
Annexin V-APC染色液避免反復凍融,凍融2次以上可能會失效。長期保存分裝后-20℃保存。
有效期:一年。
產品名稱 | Annexin V-APC/7-AAD細胞凋亡檢測試劑盒 | 貨號 | CS-C6272 |
英文名稱 | 規(guī)格 | 50T|100T |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
細胞生物學研究的常用技術有哪些:
1.顯微技術:包括顯微觀察,顯微操作.
2細胞組分分析技術:離心分離技術,生物大分子定位技術,定量細胞化學分析技術.
3.細胞工程:細胞培養(yǎng)。
注意事項:
1. 本試劑盒的檢測試劑中含有螢光素酶,反復凍融會導致其逐漸失活。盡管經測試本試劑反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響,為取得良好的使用效果,*次解凍后可適當分裝保存。反復凍融過程中,可能會導致檢測試劑中出現少量沉淀,此時宜平衡至室溫,并盡量溶解。如仍有殘留的不溶物,可以離心去除后使用,經測試不會影響后續(xù)的檢測效果。
2. 檢測時需使用白色或黑色的96孔板或384孔板。如果使用普通透明的96孔板或384孔板,相鄰孔之間會產生相互干擾。
3. 使用說明中提供了檢測ATP標準品的方法,實際檢測細胞活力時通常并不需要檢測ATP標準品。
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