死細(xì)胞核染料(碘化丙啶)

商品介紹：

碘化丙啶與DNA 結(jié)合，它不具備序列選擇性，每4~5 個(gè)堿基對進(jìn)行插入。PI 也可以與RNA 結(jié)合，因此在RNA 核酸治療中，需要區(qū)別PI 是與DNA 還是RNA 結(jié)合，但PI 一旦與核酸結(jié)合，其熒光增強(qiáng)20~30 倍，熒光激發(fā)向紅色大光位移大約30~40nm，熒光發(fā)射向藍(lán)光大位移大約15nm。雖然其摩爾吸光系數(shù)比較低，但是PI 具有一個(gè)足夠打的斯托克斯位移（stokes shift），可以通過合適的光學(xué)濾光器來檢測到其標(biāo)記的核DNA 或者標(biāo)記結(jié)合的抗體。PI 適用于熒光顯微鏡、激光共聚焦掃描顯微鏡、流式細(xì)胞儀以及熒光光度法。

商品屬性：

PI 不具備膜滲透性，通常用于多色熒光技術(shù)中區(qū)分死細(xì)胞群體。PI 的復(fù)染操作，可以涉及到多種實(shí)驗(yàn)應(yīng)用，如細(xì)胞學(xué)標(biāo)記技術(shù)、直接或間接地抗體熒光檢測、mRNA 表達(dá)原位雜交以及特定的細(xì)胞結(jié)構(gòu)熒光試劑染色。

儲(chǔ)存：-20℃，避光，有效期12個(gè)月。

步驟和注意事項(xiàng)：?

準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)環(huán)境：?確保實(shí)驗(yàn)區(qū)域清潔，?使用酒精清潔計(jì)數(shù)板和蓋玻片，?然后用吸水紙輕輕擦干。?

細(xì)胞培養(yǎng)：?

準(zhǔn)備試管或培養(yǎng)皿、?細(xì)胞培養(yǎng)基和待培養(yǎng)的細(xì)胞。?

取出保存于低溫下的細(xì)胞苗，?并加入培養(yǎng)基中，?搖晃混合均勻。?

用移液管將細(xì)胞培養(yǎng)基和細(xì)胞種植在試管或培養(yǎng)皿中。?

將試管或培養(yǎng)皿放置于恒溫培養(yǎng)箱中，?定期更換培養(yǎng)液。?

細(xì)胞凍存與復(fù)蘇：?

細(xì)胞系的凍存是將生長較好的傳代細(xì)胞懸浮在加有冷凍保護(hù)劑的溶液中，?以一定的冷凍速率降至零下某一溫度，?并在此溫度下對其長期保存的過程。?

復(fù)蘇則是將凍存的細(xì)胞系恢復(fù)到常溫的過程，?原則是“慢凍快融"，?以較大限度地保存細(xì)胞活力。?

細(xì)胞計(jì)數(shù)：?

制備細(xì)胞懸液，?使用消化單層培養(yǎng)細(xì)胞或收集懸浮培養(yǎng)細(xì)胞，?制成單個(gè)細(xì)胞懸液。?

在顯微鏡下，?用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格中的細(xì)胞數(shù)，?細(xì)胞壓中線時(shí)，?只計(jì)左側(cè)和上方者，?不計(jì)右側(cè)和下方者。?

熒光顯微鏡使用：?

使用熒光染料對細(xì)胞進(jìn)行染色，?并觀察細(xì)胞所發(fā)出的熒光信號(hào)，?以研究細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能。?

聚合酶鏈反應(yīng)（?PCR）?：?

準(zhǔn)備PCR反應(yīng)所需的DNA模板、?引物、?聚合酶和核苷酸。?

按照PCR反應(yīng)液配制表制備反應(yīng)液。?

在反應(yīng)器中加入反應(yīng)液，?開始PCR反應(yīng)。?

PCR反應(yīng)的成功與否，?可以通過電泳、?測序等方法進(jìn)一步確認(rèn)。?

轉(zhuǎn)染：?

準(zhǔn)備轉(zhuǎn)染所需的載體DNA和細(xì)胞。?

制備轉(zhuǎn)染試劑，?將DNA載體溶解于轉(zhuǎn)染試劑中，?與細(xì)胞混合均勻。?

處理轉(zhuǎn)染細(xì)胞，?并進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)。?

在操作過程中，?應(yīng)注意實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)范，?避免隨意丟棄垃圾，?及時(shí)登記購買耗材或試劑，?保持實(shí)驗(yàn)環(huán)境的清潔和安全

下列是公司正在出售的產(chǎn)品：