細胞骨架染色試劑盒-C12

商品屬性：

商品介紹：

細胞骨架(cytoskeleton)是真核細胞中由蛋白質(zhì)聚合而成的三維的纖維狀網(wǎng)架體系。細胞骨架包括微絲、微管和中間纖維。細胞骨架在維持細胞形態(tài)，承受外力、保持細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)的有序性方面起重要作用。細胞骨架肌動蛋白是球形的、大約42kd的蛋白，在幾乎所有的真核細胞都存在。這是一個非常保守的蛋白，在各物種差異不超過20%。肌動蛋白是兩種細胞內(nèi)絲狀結(jié)構(gòu)的構(gòu)成單體：微絲(三種主要的細胞骨架成分之一)，以及細肌絲(是肌肉細胞收縮復(fù)合物的一部分)。肌動蛋白參與很多重要的細胞功能，包括肌肉收縮，細胞移動，細胞分裂和胞質(zhì)分裂、小泡和細胞器的運動、細胞信號，以及細胞連接和細胞形態(tài)的保持和建立。

顯示細胞骨架的常用方法有兩種：骨架蛋白染色法和免疫熒光染色法。骨架蛋白染色法具有簡單易行的特點，但不能區(qū)分骨架蛋白的組成，有些類型的纖維太細,在光學(xué)顯微鏡下無法分辨，常用于骨架形態(tài)及完整性研究；免疫熒光染色法可特異顯示骨架蛋白，是用一種微絲解聚抑制劑,它與肌動蛋白纖絲有強親和作用,使肌動蛋白纖絲穩(wěn)定,抑制解聚,且只與F-actin 結(jié)合.因此,利用熒光標(biāo)記可以清晰顯示細胞中微絲的形態(tài),利用熒光顯微鏡對熒光標(biāo)記的細胞骨架進行觀察,可以得到清晰的實驗結(jié)果.具有更普遍的應(yīng)用意義。

儲存條件：染料-20℃避光保存；稀釋液2-8℃保存。

有效期：六個月。

步驟和注意事項：?

準(zhǔn)備實驗環(huán)境：?確保實驗區(qū)域清潔，?使用酒精清潔計數(shù)板和蓋玻片，?然后用吸水紙輕輕擦干。?

細胞培養(yǎng)：?

準(zhǔn)備試管或培養(yǎng)皿、?細胞培養(yǎng)基和待培養(yǎng)的細胞。?

取出保存于低溫下的細胞苗，?并加入培養(yǎng)基中，?搖晃混合均勻。?

用移液管將細胞培養(yǎng)基和細胞種植在試管或培養(yǎng)皿中。?

將試管或培養(yǎng)皿放置于恒溫培養(yǎng)箱中，?定期更換培養(yǎng)液。?

細胞凍存與復(fù)蘇：?

細胞系的凍存是將生長較好的傳代細胞懸浮在加有冷凍保護劑的溶液中，?以一定的冷凍速率降至零下某一溫度，?并在此溫度下對其長期保存的過程。?

復(fù)蘇則是將凍存的細胞系恢復(fù)到常溫的過程，?原則是“慢凍快融"，?以較大限度地保存細胞活力。?

細胞計數(shù)：?

制備細胞懸液，?使用消化單層培養(yǎng)細胞或收集懸浮培養(yǎng)細胞，?制成單個細胞懸液。?

在顯微鏡下，?用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格中的細胞數(shù)，?細胞壓中線時，?只計左側(cè)和上方者，?不計右側(cè)和下方者。?

熒光顯微鏡使用：?

使用熒光染料對細胞進行染色，?并觀察細胞所發(fā)出的熒光信號，?以研究細胞結(jié)構(gòu)和功能。?

聚合酶鏈反應(yīng)（?PCR）?：?

準(zhǔn)備PCR反應(yīng)所需的DNA模板、?引物、?聚合酶和核苷酸。?

按照PCR反應(yīng)液配制表制備反應(yīng)液。?

在反應(yīng)器中加入反應(yīng)液，?開始PCR反應(yīng)。?

PCR反應(yīng)的成功與否，?可以通過電泳、?測序等方法進一步確認。?

轉(zhuǎn)染：?

準(zhǔn)備轉(zhuǎn)染所需的載體DNA和細胞。?

制備轉(zhuǎn)染試劑，?將DNA載體溶解于轉(zhuǎn)染試劑中，?與細胞混合均勻。?

處理轉(zhuǎn)染細胞，?并進行下一步實驗。?

在操作過程中，?應(yīng)注意實驗室安全規(guī)范，?避免隨意丟棄垃圾，?及時登記購買耗材或試劑，?保持實驗環(huán)境的清潔和安全

下列是公司正在出售的產(chǎn)品：