支原體染色檢測試劑盒細胞組織染色

商品介紹：

本試劑盒是用于在培養(yǎng)細胞中原位染色檢測支原體或其它原核生物的試劑盒。主要用于檢測培養(yǎng)細胞中是否存在支原體污染。本試劑盒如用于六孔板樣品檢測，至少可以檢測100個樣品。

商品屬性：

試劑盒組分：

固定液——————100ml

Hoechst染色液————10ml

抗熒光淬滅封片液———10ml

培養(yǎng)細胞中的細菌污染、酵母污染或霉菌污染都在光學顯微鏡下可見，但支原體污染在光學顯微鏡下不可見，必須通過特定的檢測方法進行檢測。

檢測支原體污染的方法有很多種，包括支原體分離培養(yǎng)、支原體特異酶檢測、RT-PCR檢測以及DNA熒光染色檢測。上述檢測方法中，除DNA熒光染色檢測外操作步驟相對比較煩瑣并且所需時間較長。本支原體染色檢測試劑盒是通過Hoechst染色來檢測支原體的。本試劑盒的熒光染色可快速、有效、高靈敏度地檢測支原體污染。

本試劑盒的檢測效果圖參考上圖。左圖為無支原體污染情況，中圖為支原體輕度污染情況，箭頭所指為微粒狀的一些支原體，右圖為支原體重度污染情況，可見大量微粒狀的支原體。

如果發(fā)現(xiàn)有支原體污染，建議更換無污染的細胞進行培養(yǎng)。如果有必要去除支原體，可以使用Mycoplasma Removal Agent、cyprofloxacin或BM-Cyclin去除支原體污染。

注意事項：

1. Hoechst染色試劑對人體有害，請注意適當防護。

2. 固定液含有乙酸，有刺激性氣味，宜在通風櫥內(nèi)進行固定操作。

3. 熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡量當天完成檢測。

4. 檢測支原體前好用不含抗生素的培養(yǎng)液培養(yǎng)2-3代，這樣更容易檢測出支原體，因為一些抗生素可以抑制支原體生長。

步驟和注意事項：?

準備實驗環(huán)境：?確保實驗區(qū)域清潔，?使用酒精清潔計數(shù)板和蓋玻片，?然后用吸水紙輕輕擦干。?

細胞培養(yǎng)：?

準備試管或培養(yǎng)皿、?細胞培養(yǎng)基和待培養(yǎng)的細胞。?

取出保存于低溫下的細胞苗，?并加入培養(yǎng)基中，?搖晃混合均勻。?

用移液管將細胞培養(yǎng)基和細胞種植在試管或培養(yǎng)皿中。?

將試管或培養(yǎng)皿放置于恒溫培養(yǎng)箱中，?定期更換培養(yǎng)液。?

細胞凍存與復蘇：?

細胞系的凍存是將生長較好的傳代細胞懸浮在加有冷凍保護劑的溶液中，?以一定的冷凍速率降至零下某一溫度，?并在此溫度下對其長期保存的過程。?

復蘇則是將凍存的細胞系恢復到常溫的過程，?原則是“慢凍快融"，?以較大限度地保存細胞活力。?

細胞計數(shù)：?

制備細胞懸液，?使用消化單層培養(yǎng)細胞或收集懸浮培養(yǎng)細胞，?制成單個細胞懸液。?

在顯微鏡下，?用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格中的細胞數(shù)，?細胞壓中線時，?只計左側(cè)和上方者，?不計右側(cè)和下方者。?

熒光顯微鏡使用：?

使用熒光染料對細胞進行染色，?并觀察細胞所發(fā)出的熒光信號，?以研究細胞結(jié)構(gòu)和功能。?

聚合酶鏈反應（?PCR）?：?

準備PCR反應所需的DNA模板、?引物、?聚合酶和核苷酸。?

按照PCR反應液配制表制備反應液。?

在反應器中加入反應液，?開始PCR反應。?

PCR反應的成功與否，?可以通過電泳、?測序等方法進一步確認。?

轉(zhuǎn)染：?

準備轉(zhuǎn)染所需的載體DNA和細胞。?

制備轉(zhuǎn)染試劑，?將DNA載體溶解于轉(zhuǎn)染試劑中，?與細胞混合均勻。?

處理轉(zhuǎn)染細胞，?并進行下一步實驗。?

在操作過程中，?應注意實驗室安全規(guī)范，?避免隨意丟棄垃圾，?及時登記購買耗材或試劑，?保持實驗環(huán)境的清潔和安全

下列是公司正在出售的產(chǎn)品：