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當前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>科研細胞>>原代細胞>> 人結(jié)腸癌組織源細胞
貨號 | CS-X3111 | 規(guī)格 | 5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
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生長特性 | 貼壁 | 組織來源 | 結(jié)腸癌組織 |
產(chǎn)品信息:
貨號 | CS-X3111 | 組織來源 | 結(jié)腸癌組織 |
傳代特性 | 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài) | 培養(yǎng)基 | 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 |
細胞形態(tài) | 梭形、多角形 | 生長特性 | 貼壁 |
培養(yǎng)條件 | 氣相:空氣,95%;CO2,5% | 換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
商品介紹:
產(chǎn)品名稱:人結(jié)腸癌組織源細胞 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介: 人結(jié)腸癌組織源細胞分離自患有結(jié)腸癌病人的結(jié)腸癌組織;結(jié)腸癌是常見的發(fā)生于結(jié)腸部位的消化道惡性腫瘤,好發(fā)于直腸與乙狀結(jié)腸交界處,以40~50歲年齡組發(fā)病率高,男女之比為2~3:1。發(fā)病率占胃腸道腫瘤的第3位。結(jié)腸癌主要為腺癌、黏液腺癌、未分化癌。大體形態(tài)呈息肉狀、潰瘍型等。結(jié)腸癌可沿腸壁環(huán)行發(fā)展,沿腸管縱徑上下蔓延或向腸壁深層浸潤,除經(jīng)淋巴管、血流轉(zhuǎn)移和局部侵犯外,還可向腹腔內(nèi)種植或沿縫線、切口面擴散轉(zhuǎn)移。慢性結(jié)腸炎患者、結(jié)腸息肉患者、男性肥胖者等為易感人群。人結(jié)腸癌組織源細胞不僅廣泛應(yīng)用于分子、細胞生物學和生物醫(yī)學基礎(chǔ)研究,如蛋白質(zhì)組學、基因組學、細胞株(系)研究、DNA,RNA和遺傳學研究等,還可應(yīng)用于當今熱門的生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)如藥物篩選、藥物代謝和毒理研究、癌癥藥物的研究等。人結(jié)腸癌組織源細胞在生物醫(yī)藥領(lǐng)域有不可替代性作用。 5.方法簡介: 公司實驗室分離的癌組織源細胞采用膠原酶消化、經(jīng)Percoll離心純化制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測: 公司實驗室分離的人結(jié)腸癌組織源細胞經(jīng)檢測,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細胞形態(tài) 梭形、多角形 傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳 消化液 0.25%yi蛋白酶 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% |
細胞保存方法:
(一)細胞凍存
1. 配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液;
2. 取對數(shù)生長期的細胞,去除舊培養(yǎng)液,用PBS清洗。
3. 去除PBS,加入適量(覆蓋培養(yǎng)皿表面)把單層生長的細胞消化下來;
4. 離心1000rpm,5min;
5. 去除,加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,計數(shù),調(diào)節(jié)凍存液中細胞的最終密度為5×106/ml~1×107/ml;
6. 將細胞分裝入凍存管中,每管1~1.5 ml;
7. 在凍存管上標明細胞的名稱,凍存時間及操作者;
8. 凍存:標準的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/ min;當溫度達-25℃以下時,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時,則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中過夜,取出凍存管,移入液氮容器內(nèi)。
注意事項:
1)、欲冷凍保存之細胞應(yīng)在生長良好且存活率高之狀態(tài),約為80~90%致密度。冷凍前檢測細胞是否仍保有其性質(zhì),應(yīng)在冷凍保存前一至二日測試是否有抗體之產(chǎn)生。
2)、細胞在液氮中可長期凍存無,而不會影響細胞活力;在-70度可保存數(shù)月。
3)、注意冷凍保護劑之品質(zhì)。DMSO應(yīng)為試劑級等級,無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產(chǎn)品,如Sigma D-2650),以5~10 ml小體積分裝,4 ℃避光保存,勿作多次解凍。Glycerol亦應(yīng)為試劑級等級,以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用,因長期儲存后對細胞會有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液,可避免DMSO直接加入時釋放的熱量對細胞的損傷。緩慢逐滴加入細胞懸液是使細胞逐步適應(yīng)高滲,可降低細胞受損。DMSO可能引起部分白血病細胞株的分化,可換用10%甘油凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞 | 人肌suan激mei同工meiMM(CK-MM)試劑盒ELISA |
大鼠乳腺成纖維細胞 | 人內(nèi)皮型合成mei(eNOS)試劑盒ELISA |
大鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞 | 人高半(Hcy)ELISA檢測試劑盒 |
大鼠腎臟巨噬細胞 | 人FOS 樣抗原2(FOSL2)試劑盒ELISA |
大鼠視網(wǎng)膜微血管周細胞 | 雞傷PCR試劑盒 |
大鼠胃黏膜上皮細胞 | 瓜蔞子染料法PCR鑒定試劑盒 |
大鼠小梁網(wǎng)細胞 | 人β--半乳糖苷mei基因PCR檢測試劑盒 |
大鼠嗅鞘細胞 | 胎兒三毛滴蟲PCR檢測試劑盒 |
大鼠牙齦上皮細胞 | 萊氏無膽甾原體PCR試劑盒 |
大鼠胰腺星狀細胞 | 人多瘤病毒7 PCR試劑盒 |
大鼠脂肪干細胞 | 人白血病μ-BCR-ABL融合基因PCR檢測試劑盒 |
雞骨骼肌細胞 | 里氏立克次氏體PCR檢測試劑盒 |
大鼠滋養(yǎng)層干細胞 | 人結(jié)腸癌組織源細胞類鼻疽伯克霍爾德菌(BP)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法) |
人Ⅱ型肺泡上皮細胞 | 熱帶利什曼原蟲PCR檢測試劑盒 |
人成骨細胞 | 人腫瘤多藥耐藥基因PCR檢測試劑盒 |
操作步驟:
1)、冷凍前24-48小時更換半量或全量培養(yǎng)基,使細胞處于指數(shù)生長期。
2)、配制冷凍保存溶液(使用前配制):另取一離心管,加入培養(yǎng)基、血清,逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度,即制成雙倍的凍存液,置于室溫下待用。
3)、離心收集培養(yǎng)之細胞,用加血清的培養(yǎng)基重懸起細胞,取少量細胞懸浮液(約0. 1 ml)計數(shù)細胞濃度及凍前存活率。
4)、取與細胞懸液等量的凍存液,緩慢逐滴加入細胞懸液,并晃動試管,制成細胞凍存懸液(DMSO后濃度為5~10%),使細胞濃度為1~5×106cells/ ml,混合均勻,分裝于已標示之冷凍保存管中,1~2 ml/vial,并取少量細胞懸浮液作污染檢測。嚴密封口后,注明細胞名稱、代數(shù)、日期。然后進行凍存。
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