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當前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>科研細胞>>原代細胞>> 兔晶狀體上皮細胞
產(chǎn)地 | 國產(chǎn) | 規(guī)格 | 5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
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組織來源 | 晶狀體組織 | 貨號 | CS-X2695 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 |
產(chǎn)品信息:
貨號 | CS-X2695 | 組織來源 | 晶狀體組織 |
傳代特性 | 可傳2-3代 | 培養(yǎng)基 | 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
培養(yǎng)條件 | 換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
商品介紹:
產(chǎn)品名稱:兔晶狀體上皮細胞 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介: 兔晶狀體上皮細胞分離自晶狀體組織;晶狀體源自胚胎發(fā)育外胚層,僅含有上皮細胞及其產(chǎn)物,晶狀體囊膜作為屏障將晶狀體與其它類型細胞分開;因而,晶狀體上皮細胞培養(yǎng)既無神經(jīng)和血管組織的干擾,又不受其它類型細胞如成纖維細胞的污染,保證了培養(yǎng)中細胞成分的單一性。晶狀體上皮細胞主要負責調(diào)節(jié)晶狀體的生理平衡,包括電解質(zhì)和液體的輸送。在正常的發(fā)育過程中,晶狀體上皮細胞分化和成熟,然后遷移到晶狀體內(nèi)部,產(chǎn)生晶體蛋白,自身也拉長而變成晶狀體纖維細胞,并最終失去細胞核和其它的細胞器。研究表明,晶狀體上皮細胞的分化和極化受到了眼部液體中的生長因子的調(diào)控,包括表皮生長因子和胰島素等。細胞貼壁后為扁平不規(guī)則多角形,呈單層生長、連成膜狀。晶狀體上皮細胞是緊密貼附于晶狀體前囊內(nèi)表面的單層上皮細胞,其異常增殖和分化與白內(nèi)障和后囊混濁的發(fā)生密切相關(guān),體外培養(yǎng)是研究其生長規(guī)律的主要手段。 5.方法簡介: 公司實驗室分離的兔晶狀體上皮細胞采用yi蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測: 公司實驗室分離的兔晶狀體上皮細胞經(jīng)BFSP2(晶狀體蛋白)免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) 培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細胞形態(tài) 上皮細胞樣 傳代特性 可傳2-3代 消化液 0.25%yi蛋白酶 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% |
細胞保存方法:
(一)細胞凍存
1. 配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液;
2. 取對數(shù)生長期的細胞,去除舊培養(yǎng)液,用PBS清洗。
3. 去除PBS,加入適量(覆蓋培養(yǎng)皿表面)把單層生長的細胞消化下來;
4. 離心1000rpm,5min;
5. 去除,加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,計數(shù),調(diào)節(jié)凍存液中細胞的最終密度為5×106/ml~1×107/ml;
6. 將細胞分裝入凍存管中,每管1~1.5 ml;
7. 在凍存管上標明細胞的名稱,凍存時間及操作者;
8. 凍存:標準的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/ min;當溫度達-25℃以下時,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時,則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中過夜,取出凍存管,移入液氮容器內(nèi)。
注意事項:
1)、欲冷凍保存之細胞應在生長良好且存活率高之狀態(tài),約為80~90%致密度。冷凍前檢測細胞是否仍保有其性質(zhì),應在冷凍保存前一至二日測試是否有抗體之產(chǎn)生。
2)、細胞在液氮中可長期凍存無,而不會影響細胞活力;在-70度可保存數(shù)月。
3)、注意冷凍保護劑之品質(zhì)。DMSO應為試劑級等級,無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產(chǎn)品,如Sigma D-2650),以5~10 ml小體積分裝,4 ℃避光保存,勿作多次解凍。Glycerol亦應為試劑級等級,以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用,因長期儲存后對細胞會有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液,可避免DMSO直接加入時釋放的熱量對細胞的損傷。緩慢逐滴加入細胞懸液是使細胞逐步適應高滲,可降低細胞受損。DMSO可能引起部分白血病細胞株的分化,可換用10%甘油凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔骺軟骨細胞 | 人前纖維蛋白1抗體ELISA檢測試劑盒 |
NCTC clone 929 [L cell, L-929] (小鼠成纖維細胞) | 人5羥色胺(5-HT)檢測試劑盒 |
NK細胞 | 人卵清白蛋白檢測試劑盒 |
OV-90 (人卵巢癌細胞) | 大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β刺激蛋白22(TSC22)檢測試劑盒 |
PA319 (人大腸癌細胞) | 耐久腸球菌PCR試劑盒 |
PC-3M IE8 (人前列腺癌高轉(zhuǎn)移細胞株) | 柯薩奇病毒A16型變種RT-PCR試劑盒 |
Pt K1 [NBL-3] (袋鼠腎細胞) | 神經(jīng)肉孢子蟲PCR檢測試劑盒 |
Ramos [RA 1] (人B淋巴細胞瘤細胞) | 海豹分支桿菌PCR檢測試劑盒 |
RH-35 (大鼠肝癌細胞) | 蛤弧菌PCR試劑盒 |
RPMI 8226 (人多發(fā)性骨髓瘤外周血B淋巴細胞) | 水痘-帶狀皰疹病毒PCR試劑盒 |
SBC-2(人小細胞肺癌細胞) | 偷死野田村病毒PCR檢測試劑盒 |
SK-MEL-1 (人皮膚黑色素瘤細胞) | 海鷗彎曲桿菌PCR試劑盒 |
Sf9 (昆蟲卵巢細胞) | 兔晶狀體上皮細胞龜分枝桿菌PCR試劑盒 |
SNB-19 (人膠質(zhì)瘤細胞) (U-251 MG污染細胞系,暫不供應) | 同豬皰疹病毒Ⅰ型奧葉茲基氏病病毒PCR檢測試劑盒 |
ST (豬睪丸細胞) | 辛諾柏病毒PCR檢測試劑盒 |
操作步驟:
1)、冷凍前24-48小時更換半量或全量培養(yǎng)基,使細胞處于指數(shù)生長期。
2)、配制冷凍保存溶液(使用前配制):另取一離心管,加入培養(yǎng)基、血清,逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度,即制成雙倍的凍存液,置于室溫下待用。
3)、離心收集培養(yǎng)之細胞,用加血清的培養(yǎng)基重懸起細胞,取少量細胞懸浮液(約0. 1 ml)計數(shù)細胞濃度及凍前存活率。
4)、取與細胞懸液等量的凍存液,緩慢逐滴加入細胞懸液,并晃動試管,制成細胞凍存懸液(DMSO后濃度為5~10%),使細胞濃度為1~5×106cells/ ml,混合均勻,分裝于已標示之冷凍保存管中,1~2 ml/vial,并取少量細胞懸浮液作污染檢測。嚴密封口后,注明細胞名稱、代數(shù)、日期。然后進行凍存。
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