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規(guī)格	5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶	組織來源	胰腺組織
貨號	CS-X2755	細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞保存方法：

（一）細(xì)胞凍存

1. 配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液；

2. 取對數(shù)生長期的細(xì)胞，去除舊培養(yǎng)液，用PBS清洗。

3. 去除PBS，加入適量（覆蓋培養(yǎng)皿表面）把單層生長的細(xì)胞消化下來；

4. 離心1000rpm，5min；

5. 去除，加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，計(jì)數(shù)，調(diào)節(jié)凍存液中細(xì)胞的最終密度為5×106/ml～1×107/ml；

6. 將細(xì)胞分裝入凍存管中，每管1～1.5 ml；

7. 在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱，凍存時間及操作者；

8. 凍存：標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序?yàn)榻禍厮俾?1～-2℃/ min；當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃時，則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細(xì)胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ，然后放入-70℃冰箱中過夜，取出凍存管，移入液氮容器內(nèi)。

產(chǎn)品信息：

貨號	CS-X2755	組織來源	胰腺組織
傳代特性	可傳1-2代	培養(yǎng)基	含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣	生長特性	貼壁
培養(yǎng)條件		換液頻率	每2-3天換液一次

商品介紹：

產(chǎn)品名稱：大鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞
2.組織來源：胰腺組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡介：

大鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞分離自胰腺組織；胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有碳酸氫、yi蛋白酶原、脂肪酶、淀粉等。胰液通過胰腺管排入十二指腸，有消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖的作用。內(nèi)分泌腺由大小不同的細(xì)胞團(tuán)──胰島所組成，胰島主要由4種細(xì)胞組成：α細(xì)胞、β細(xì)胞、γ細(xì)胞及PP細(xì)胞。α細(xì)胞分泌胰高血糖素，升高血糖；β細(xì)胞分泌胰島素，降低血糖；γ細(xì)胞分泌生長抑，以旁分泌的方式抑制α、β細(xì)胞的分泌；PP細(xì)胞分泌胰多肽，抑制胃腸運(yùn)動、胰液分泌和膽囊收縮。成體胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞作為胰腺前體細(xì)胞，已證實(shí)具多向分化潛能，在合適的外源性刺激下可分化成胰島樣細(xì)胞，胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化的胰島樣細(xì)胞免疫原性如何，轉(zhuǎn)分化的胰島樣細(xì)胞在治療糖尿病時是否發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，對干細(xì)胞臨床治療糖尿病具有重要意義。

5.方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞采用yi蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合密度梯度離心法、差速貼壁法，并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

包被條件鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性可傳1-2代

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞

操作步驟：

1）、冷凍前24-48小時更換半量或全量培養(yǎng)基，使細(xì)胞處于指數(shù)生長期。

2）、配制冷凍保存溶液(使用前配制)：另取一離心管，加入培養(yǎng)基、血清，逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度，即制成雙倍的凍存液，置于室溫下待用。

3）、離心收集培養(yǎng)之細(xì)胞，用加血清的培養(yǎng)基重懸起細(xì)胞，取少量細(xì)胞懸浮液(約0. 1 ml)計(jì)數(shù)細(xì)胞濃度及凍前存活率。

4）、取與細(xì)胞懸液等量的凍存液，緩慢逐滴加入細(xì)胞懸液，并晃動試管，制成細(xì)胞凍存懸液(DMSO后濃度為5～10%)，使細(xì)胞濃度為1～5×106cells/ ml，混合均勻，分裝于已標(biāo)示之冷凍保存管中，1～2 ml/vial，并取少量細(xì)胞懸浮液作污染檢測。嚴(yán)密封口后，注明細(xì)胞名稱、代數(shù)、日期。然后進(jìn)行凍存。

注意事項(xiàng)：

1）、欲冷凍保存之細(xì)胞應(yīng)在生長良好且存活率高之狀態(tài)，約為80～90%致密度。冷凍前檢測細(xì)胞是否仍保有其性質(zhì)，應(yīng)在冷凍保存前一至二日測試是否有抗體之產(chǎn)生。

2）、細(xì)胞在液氮中可長期凍存無，而不會影響細(xì)胞活力;在-70度可保存數(shù)月。

3）、注意冷凍保護(hù)劑之品質(zhì)。DMSO應(yīng)為試劑級等級，無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產(chǎn)品，如Sigma D-2650)，以5～10 ml小體積分裝，4 ℃避光保存，勿作多次解凍。Glycerol亦應(yīng)為試劑級等級，以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用，因長期儲存后對細(xì)胞會有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液，可避免DMSO直接加入時釋放的熱量對細(xì)胞的損傷。緩慢逐滴加入細(xì)胞懸液是使細(xì)胞逐步適應(yīng)高滲，可降低細(xì)胞受損。DMSO可能引起部分白血病細(xì)胞株的分化，可換用10%甘油凍存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

兔椎間盤髓核細(xì)胞	人膜聯(lián)蛋白A2(ANXA2/ANX2/ANX2L4/CAL1H/LPC2D)抗體試劑盒ELISA
小鼠棕色脂肪細(xì)胞	人β-微管蛋白(TUBB)試劑盒ELISA
293ET (人胚腎細(xì)胞(SV40T和EBNA1基因修飾細(xì)胞))	人類似cDNA順序BC027382 ELISA檢測試劑盒
3T6-Swiss albino (小鼠胚胎成纖維細(xì)胞)	雞白血病病毒抗原(ALV-AG)ELISA檢測試劑盒
A172 (人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)	多里病毒RT-PCR試劑盒
A7r5 (大鼠胸大動脈平滑肌細(xì)胞)	偽結(jié)核棒桿菌PCR試劑盒
AGS (人胃腺癌細(xì)胞)	血紅鏈球菌PCR檢測試劑盒
B16 (小鼠黑色素瘤細(xì)胞)	諾卡菌通用PCR檢測試劑盒
BC-021 (人乳腺癌細(xì)胞)	猴T淋巴細(xì)胞趨向性病毒1型RT-PCR試劑盒
bEnd.3 [BEND3] (小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞)	石斑魚源性成分PCR試劑盒
BRL 3A (大鼠肝細(xì)胞)	泰國利什曼原蟲PCR檢測試劑盒
Caco-2 (人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞)	胡桃PCR檢測試劑盒
C-33 A (人子宮頸癌細(xì)胞)	大鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞呼吸道 27 種病原體PCR檢測試劑盒
CATH.a(小鼠神經(jīng)細(xì)胞)	泰勒氏菌通用PCR檢測試劑盒
CHO-K1 (倉鼠卵巢細(xì)胞亞株)	帶絳蟲通用PCR檢測試劑盒