關(guān)于大鼠elisa檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)相信各位老師都不陌生,ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)一般包含兩個(gè)或以上的孵育步驟,中間以洗滌隔開。ELISA通常在96孔板中開展,其上包被了結(jié)合抗原或抗體。在封閉步驟后,包被后的平板首先與一抗或抗原孵育。隨后通過一些洗滌步驟去除未結(jié)合(低親和力)的抗原-抗體復(fù)合物。接著,平板與二抗孵育。這種帶有酶的抗體與高親和力的抗原-抗體復(fù)合物結(jié)合。之后,又是一輪洗滌。zui后是添加底物并檢測(cè)信號(hào)。下面就為您講解關(guān)于洗滌的具體操作。
洗滌參數(shù):
一些參數(shù)會(huì)影響洗滌步驟的效果。個(gè)主要的參數(shù)是洗滌量。自動(dòng)洗板機(jī)會(huì)分配洗滌液。如果你之前遭遇過高背景,那么不要猶豫,將洗滌量調(diào)為高,是比包被體積更高。太少的洗滌液會(huì)讓一部分分析表面洗滌不到,從而明顯增加背景。所有反應(yīng)孔的洗滌量必須相同。ELISA板的制造商通常會(huì)在試劑盒的使用手冊(cè)中列出包被量。行業(yè)中通常使用的包被量是200 µl。如果你的試劑盒也是這樣,那么制造商可能會(huì)建議使用300 µl洗滌液進(jìn)行洗滌,以便清潔整個(gè)反應(yīng)孔的壁。一般來說,洗滌量越高,則孵育步驟殘留的抗體或抗原量就越少。
洗滌次數(shù):
第二個(gè)影響洗滌效果的主要參數(shù)是洗滌循環(huán)的量。當(dāng)然,洗滌次數(shù)越多,背景越低。然而,太多次的洗滌會(huì)降低信號(hào)強(qiáng)度,使其難以測(cè)定。通常的做法是在每次抗體或抗原孵育后重復(fù)洗滌三次。不過,ELISA板的制造商會(huì)對(duì)洗滌次數(shù)提出建議。一般而言,制造商包被平板需要的洗滌次數(shù)比用戶包被的平板要少。對(duì)于用戶包被的ELISA板,必須優(yōu)化洗滌次數(shù)。
大鼠elisa檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)雖然看起來有點(diǎn)簡(jiǎn)單,但是這并不能成為我們掉以輕心的借口,實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)該仔細(xì)檢查洗滌步驟,保證實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。
YSRIBIO1484 Butabarbital CIII *標(biāo)準(zhǔn)品 125-40-6 200mg
YSRIBIO1485 Buspirone Hydrochloride 鹽酸*標(biāo)準(zhǔn)品 33396-08-2 200mg
YSRIBIO1486 Bupivacaine Related Compound A *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 50mg
YSRIBIO1487 Bupivacaine Hydrochloride 鹽酸*標(biāo)準(zhǔn)品 73360-54-0 500mg
YSRIBIO1488 Bumetanide Related Compound B *相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 28328-53-2 25mg
YSRIBIO1489 Bumetanide *標(biāo)準(zhǔn)品 28395-03-1 250mg
YSRIBIO1490 Budesonide 布*標(biāo)準(zhǔn)品 51333-22-3 200mg
大鼠elisa檢測(cè)試劑盒