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解析elisa常見的培養(yǎng)方法及特點

時間:2017/4/20閱讀:256
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進口elisa試劑盒連續(xù)式培養(yǎng)
1.連續(xù)式培養(yǎng)是一種常見的懸浮培養(yǎng)模式,采用機械攪拌式生物反應(yīng)器系統(tǒng)。該模式是將細胞接種與一定體積的培養(yǎng)基后,為了防止衰退期的出現(xiàn),在細胞達zui大密度之前,以一定速度向生物反應(yīng)器連續(xù)添加新鮮培養(yǎng)基;同時,含有細胞的培養(yǎng)物以相同的速度連續(xù)從反應(yīng)器流出,以保持培養(yǎng)體積的恒定。理論上講,該過程可無限延續(xù)下去。
2.連續(xù)培養(yǎng)的優(yōu)點是反應(yīng)器的培養(yǎng)狀態(tài)可以達到恒定,細胞在穩(wěn)定狀態(tài)下生長。穩(wěn)定狀態(tài)可有效的延長分批培養(yǎng)中的對數(shù)生長期。在穩(wěn)定狀態(tài)下細胞所處的環(huán)境條件如營養(yǎng)物質(zhì)濃度、產(chǎn)物濃度、pH值可保持恒定,細胞濃度以及細胞比生長速率可維持不變。細胞很少受到培養(yǎng)環(huán)境變化帶來的生理影響,特別是生物反應(yīng)器的主要營養(yǎng)物質(zhì)葡萄糖和*,維持在一個較低的水平,從而使他們的利用效率提高,有害產(chǎn)物積累有所減少。然而在高的稀釋率下,雖然死細胞和細胞碎片及時清除,細胞活性高zui終細胞密度得到提高;可是產(chǎn)物卻不斷在稀釋,因而產(chǎn)物濃度并為提高;尤其是細胞和產(chǎn)物不斷的稀釋,營養(yǎng)物質(zhì)利用率、細胞增長速率和產(chǎn)物生產(chǎn)速率低下。
3.連續(xù)式培養(yǎng)不足:
·ELISA由于是開放式操作,加上培養(yǎng)周期較長,容易造成污染;
·在長周期的連續(xù)培養(yǎng)中,細胞的生長特性以及分泌產(chǎn)物容易變異;
·對設(shè)備、儀器的控制技術(shù)要求較高。 連續(xù)式培養(yǎng)操作使用的反應(yīng)器多數(shù)是攪拌式生物反應(yīng)器,也可以是管式反應(yīng)器。
4.連續(xù)式培養(yǎng)的特點:
·細胞維持持續(xù)指數(shù)增長;
·產(chǎn)物體積不斷增長;
·進口elisa試劑盒可控制衰退期與下降期。

半連續(xù)式培養(yǎng)

1.ELISA半連續(xù)式培養(yǎng)又稱為重復(fù)分批式培養(yǎng)或換液培養(yǎng)。采用機械攪拌式生物反應(yīng)器系統(tǒng),懸浮培養(yǎng)形式。在細胞增長和產(chǎn)物形成過程中,每間隔一段時間,從中取出部分培養(yǎng)物,再用新的培養(yǎng)液補足到原有體積,使反應(yīng)器內(nèi)的總體積不變。 這種類型的操作是將細胞接種一定體積的培養(yǎng)基,讓其生長至一定的密度,在細胞生長至zui大密度之前,用新鮮的培養(yǎng)基稀釋培養(yǎng)物,每次稀釋反應(yīng)器培養(yǎng)體積的1/2~3/4,以維持細胞的指數(shù)生長狀態(tài),隨著稀釋率的增加培養(yǎng)體積逐步增加?;蛘咴诩毎鲩L和產(chǎn)物形成過程中,每隔一定時間,定期取出部分培養(yǎng)物,或是條件培養(yǎng)基,或是連同細胞、載體一起取出,然后補加細胞或載體,或是新鮮的培養(yǎng)基繼續(xù)進行培養(yǎng)的一種操作模式。剩余的培養(yǎng)物可作為種子,繼續(xù)培養(yǎng),從而可維持反復(fù)培養(yǎng),而無需反應(yīng)器的清洗、消毒等一系列復(fù)雜的操作。在半連續(xù)式操作中由于細胞適應(yīng)了生物反應(yīng)器的培養(yǎng)環(huán)境和相當(dāng)高的接種量,經(jīng)過幾次的稀釋、換液培養(yǎng)過程,細胞密度常常會提高。
2.半連續(xù)式特點:
·培養(yǎng)物的體積逐步增加;
·可進行多次收獲;
·ELISA細胞可持續(xù)指數(shù)生長,并可保持產(chǎn)物和細胞在一較高的濃度水平,培養(yǎng)過程可延續(xù)到很長時間。 該操作方式的優(yōu)點是操作簡便,生產(chǎn)效率高,可長時期進行生產(chǎn),反復(fù)收獲產(chǎn)品,可使細胞密度和產(chǎn)品產(chǎn)量一直保持在較高的水平。進口elisa試劑盒在動物細胞培養(yǎng)和藥品生產(chǎn)中被廣泛應(yīng)用。
 

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