在合成培養(yǎng)基的發(fā)展過種有幾點成功之處:可替代血清;針對不同類型的細胞制備zui適宜的培養(yǎng)基(例如:RPMI1640適合于類成淋巴細胞系);根據(jù)特殊的條件修正培養(yǎng)基(例如:Leibovitz L15不需要加入CO2和NaHCO3[Leibovitz,1963]).
分離和繁殖某種特殊類型的細胞可能需要一種選擇性的淋巴細胞培養(yǎng)基;而為了得到產(chǎn)物所進行的細胞培養(yǎng)(例如將細胞作為病毒繁殖的宿主,或將細胞用于非細胞特異性的分子生物學研究)則主要依賴于添加血清的Eagle’s MEM[Eagle1959]以及Dulbecco改良的DMEM[Dulbecco and Freerman,1959]或者是現(xiàn)在更多使用的RPMI1640[Moore et al.,1967].
然而許多工業(yè)化生產(chǎn)技術現(xiàn)在使用的是無血清培養(yǎng)基,這樣做有利于產(chǎn)物的下游處理并可減少外來污染.在許多實驗室還流行一種折中的方法:即將一種成分復雜的培養(yǎng)基(例如Ham’s F12[Ham,1965])與一種氨基酸和維生素含量較高的培養(yǎng)基(例如:DMEM)混合使用.
這種培養(yǎng)基不利于純化產(chǎn)物,人ELISA試劑盒純度很高,對于原代培養(yǎng)以及細胞系的繁殖卻可以產(chǎn)生多方面的促進作用.
動物細胞體外大規(guī)模培養(yǎng)技術是在人工條件下,設定pH、溫度、溶氧等,在細胞培養(yǎng)載體(容器)中高密度大量培養(yǎng)動物細胞用于生產(chǎn)生物制品的技術。常用的大規(guī)模培養(yǎng)的動物細胞有雞胚成纖維細胞、原代地鼠腎細胞等多種元代細胞,及*、CHO細胞、Vero細胞等。這些細胞在疫苗生產(chǎn)、單抗制備、紅細胞生成素等產(chǎn)品領域廣泛應用。
目前常用的細胞大規(guī)模培養(yǎng)方法有轉瓶培養(yǎng),細胞工廠培養(yǎng),生物反應器培養(yǎng)等。轉瓶技術為傳統(tǒng)的貼壁細胞培養(yǎng)技術,細胞接種在旋轉的圓筒形培養(yǎng)器-轉瓶中,培養(yǎng)過程中轉瓶不斷旋轉,使細胞交替接觸培養(yǎng)液和空氣。轉瓶培養(yǎng)基具有結構簡單,投資少,技術成熟,放大只需簡單的增加轉瓶數(shù)量等優(yōu)點。但也有其缺點:勞動強度大,占地空間大,單位體積提供細胞生長的表面積小,細胞生長密度低,瓶間差異較難控制等,因而難以產(chǎn)業(yè)化或規(guī)模化生產(chǎn)。