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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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組蛋白乙?;c大腦功能和抗血清的制備

時(shí)間:2016/3/11閱讀:315
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    研究人員發(fā)現(xiàn),組蛋白和非組蛋白的賴氨酸乙?;腔虮磉_(dá)的關(guān)鍵調(diào)節(jié)子,控制著大量的細(xì)胞生物學(xué)過(guò)程,包括神經(jīng)元的生長(zhǎng)及其可塑性。越來(lái)越多的研究表明,賴氨酸的乙?;腿ヒ阴;瘜?duì)于大腦功能和相關(guān)疾病非常重要。研究人員zui近發(fā)表綜述,探討了組蛋白乙酰化和去乙?;诖竽X功能(尤其是認(rèn)知功能)中起到的作用。

    將突觸活性與基因表達(dá)關(guān)聯(lián)起來(lái)的轉(zhuǎn)錄程序,對(duì)于大腦可塑性非常關(guān)鍵,而可塑性是大腦功能的基礎(chǔ)。組蛋白乙?;苷{(diào)節(jié)這些轉(zhuǎn)錄程序,實(shí)際上在許多情況下,轉(zhuǎn)錄因子和組蛋白修飾酶會(huì)一起被招募到與可塑性有關(guān)的基因上。賴氨酸乙?;怯少嚢彼嵋阴^D(zhuǎn)移酶(KAT)催化的,一般是促進(jìn)大腦的認(rèn)知能力。相反的過(guò)程由組蛋白賴氨酸去乙?;肛?fù)責(zé)(HDAC),在多個(gè)大腦區(qū)域?qū)φJ(rèn)知能力進(jìn)行負(fù)調(diào)節(jié)。

    KAT或HDAC發(fā)生突變或調(diào)控異常,會(huì)引起神經(jīng)機(jī)能障礙和神經(jīng)退行性變。而HDAC抑制子可以作為治療藥物,對(duì)抗衰老和神經(jīng)退行性疾病引起的認(rèn)知衰退,改善抑郁癥和創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙等疾病的癥狀。

    抗血清指含有抗體的血清。傳統(tǒng)的抗血清制備方法是將某種抗原通過(guò)多次注入動(dòng)物,數(shù)十天后或數(shù)月后,采集動(dòng)物血,立即分離出血清。此抗血清在保存或應(yīng)用前必須作效價(jià)和特異性鑒定及純化。 

(一)免疫動(dòng)物的選擇 

免疫動(dòng)物的選擇基本要求: 

1.抗原與免疫動(dòng)物的種屬差異越遠(yuǎn)越好。 

2.動(dòng)物必須適齡、健壯、無(wú)感染、體重合乎要求。 

3.不同動(dòng)物對(duì)同一免疫原有不同的免疫應(yīng)答表現(xiàn)。因此針對(duì)不同性質(zhì)的免疫原,選用相應(yīng)的動(dòng)物。蛋白質(zhì)抗原大部分動(dòng)物皆適合;甾類激素多用家免;酶類多用豚鼠。 

4.抗血清要求:為R(rabbit)型或H(horse)型血清。R型抗血清是以家兔為代表的小型動(dòng)物產(chǎn)生的抗血清,能和很小量抗原結(jié)合形成沉淀線,而H型抗血清則以馬為代表的大型動(dòng)物產(chǎn)生的抗血清,較少用于沉淀反應(yīng)。 

此外需要制備大量免疫血清時(shí),應(yīng)選用馬、綿羊等大動(dòng)物;若需要量不多,則選用家兔、豚鼠和雞等小動(dòng)物。

(二)免疫方法及途徑 

1.免疫原的注射劑量:應(yīng)考慮抗原性強(qiáng)弱、分子量大小、動(dòng)物的個(gè)體狀態(tài)和免疫時(shí)間??贵w需要量多,時(shí)間間隔長(zhǎng),劑量可適當(dāng)加大。 血清

2.免疫途徑:通常有靜脈、腹腔、肌肉、皮內(nèi)、皮下、淋巴結(jié)及足掌等。若抗原寶貴可采用淋巴結(jié)內(nèi)微量注射法;半抗原宜皮內(nèi)多點(diǎn)注射。 

3.免疫方案:根據(jù)設(shè)計(jì)的目的要求、抗原性質(zhì)、佐劑的種類來(lái)制定免疫方案。可采用全量免疫法、微量免疫法或混合免疫法。 

4.抗體產(chǎn)生階段:可分靜止期(約2天,血中尚無(wú)抗體);指數(shù)期(約4天左右,抗體迅速上升);穩(wěn)定期(約2~4周,抗體保持一個(gè)穩(wěn)定水平);下降期(約幾個(gè)月后,此時(shí)抗體緩慢下降)四個(gè)階段。 

(三)動(dòng)物采血法 

動(dòng)物采血法有頸動(dòng)脈放血法、心臟采血法、靜脈多次采血法等。血清

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