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技術(shù)文章

ELISA檢測試劑盒常見問題使用指南

閱讀：304發(fā)布時間：2013-3-29

ELISA檢測試劑盒使用指南
步驟 常見問題 解決方案
實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備 1 加樣器不準(zhǔn)確；尤其10ul以下的加樣器，對結(jié)果影響極大；
2 保溫設(shè)備不良；
3 洗滌用水不規(guī)范。		 1 校正加樣器；10ul以下加樣器采用進(jìn)口產(chǎn)品（芬蘭、法國等）；
2 仔細(xì)校正溫度到37℃，水浴 箱為佳；
3 必須使用去離子水或蒸餾 水，不得用自來水、礦泉水等。
4 認(rèn)真閱讀使用說明書。
樣品加樣 1 加樣不準(zhǔn)確；
2 沒有混勻。		 1 加樣時一定要仔細(xì)。加樣后，再檢查，以防漏加、錯加。
2 加樣后，反復(fù)抽吸3次混勻，防止血清 聚集孔底，導(dǎo)致非特異性吸附。
洗滌 洗滌不* 1 每次注水洗滌，應(yīng)靜止30秒鐘；
2 選用吸水紙作為襯墊，每次洗滌后扣干孔內(nèi)水分；
3 可選用塑料洗滌瓶。
加酶反應(yīng) 漏加 滴加后，認(rèn)真檢查各孔
結(jié)果判斷 1 包括陰性對照孔在內(nèi)，各孔顯色普遍偏深；
2 包括陽性對照在內(nèi)，各孔均無顯色；
3 陽性對照不顯色，而其它樣本顯色正常；
4 有些標(biāo)本顯色不深，判斷陽性困難。		 1 可能是洗滌不充分；加樣過量；溫育時間過長溫度過高；按說明書重新操作。如無改善，可與生產(chǎn)廠家；
2 可能是漏加樣本或酶液；溫育時間過短溫度過低；試劑保存不當(dāng)活性下降；按說明書重新操作。如無改善，可與生產(chǎn)廠家；
3 陽性對照漏加、錯加或失效。重新操作。如無改善，可與廠家，索要對照品；
4 重新操作。使用酶標(biāo)儀 ，測定光吸收度，按P/N值標(biāo)準(zhǔn)判斷。
試劑保存 保存不規(guī)范 一定要在2-8℃存放。不得過高，也不得凍存（凍存后，酶液將失效）。
對照品 對照品為凍干品 按對照管標(biāo)示，加入相應(yīng)體積的去離子水或蒸餾 水復(fù)溶，充分溶解混勻?？砂凑f明書使用。
其它 1 如果對試劑有意見和建議，歡迎隨時通過、電郵、上網(wǎng)、等方式與我公司。我們一定會提供熱情的服務(wù)。多謝支持！
2 以上所述器材，我公司也有供應(yīng)，如有需要，晶美生物訂購。
ELISA檢測試劑盒使用指南

步驟 常見問題 解決方案
實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備 1 加樣器不準(zhǔn)確；尤其10ul以下的加樣器，對結(jié)果影響極大；
2 保溫設(shè)備不良；
3 洗滌用水不規(guī)范。 1 校正加樣器；10ul以下加樣器采用進(jìn)口產(chǎn)品（芬蘭、法國等）；
2 仔細(xì)校正溫度到37℃，水浴 箱為佳；
3 必須使用去離子水或蒸餾 水，不得用自來水、礦泉水等。
4 認(rèn)真閱讀使用說明書。
樣品加樣 1 加樣不準(zhǔn)確；
2 沒有混勻。 1 加樣時一定要仔細(xì)。加樣后，再檢查，以防漏加、錯加。
2 加樣后，反復(fù)抽吸3次混勻，防止血清 聚集孔底，導(dǎo)致非特異性吸附。
洗滌 洗滌不* 1 每次注水洗滌，應(yīng)靜止30秒鐘；
2 選用吸水紙作為襯墊，每次洗滌后扣干孔內(nèi)水分；
3 可選用塑料洗滌瓶。
加酶反應(yīng) 漏加 滴加后，認(rèn)真檢查各孔
結(jié)果判斷 1 包括陰性對照孔在內(nèi)，各孔顯色普遍偏深；
2 包括陽性對照在內(nèi)，各孔均無顯色；
3 陽性對照不顯色，而其它樣本顯色正常；
4 有些標(biāo)本顯色不深，判斷陽性困難。 1 可能是洗滌不充分；加樣過量；溫育時間過長溫度過高；按說明書重新操作。如無改善，可與生產(chǎn)廠家；
2 可能是漏加樣本或酶液；溫育時間過短溫度過低；試劑保存不當(dāng)活性下降；按說明書重新操作。如無改善，可與生產(chǎn)廠家；
3 陽性對照漏加、錯加或失效。重新操作。如無改善，可與廠家，索要對照品；
4 重新操作。使用酶標(biāo)儀 ，測定光吸收度，按P/N值標(biāo)準(zhǔn)判斷。
試劑保存 保存不規(guī)范 一定要在2-8℃存放。不得過高，也不得凍存（凍存后，酶液將失效）。
對照品 對照品為凍干品 按對照管標(biāo)示，加入相應(yīng)體積的去離子水或蒸餾 水復(fù)溶，充分溶解混勻?？砂凑f明書使用。
其它 1 如果對試劑有意見和建議，歡迎隨時通過、電郵、上網(wǎng)、等方式與我公司。我們一定會提供熱情的服務(wù)。多謝支持！
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