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上海瑞齊生物科技有限公司

從Western blot的繁重勞動中解放出來

時間:2015-5-8閱讀:567
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從Western blot的繁重勞動中解放出來
摘要: 
Western blot想一次成功,那幾乎是mission impossible。這么多的環(huán)節(jié),這么多的試劑,往往需要反復(fù)優(yōu)化,才能獲得理想的結(jié)果。然而,一家公司提出了一個很牛的口號,那就是“絕不多跑一次(Never Run a Gel Again)"。這家公司就是ProteinSimple。 
Western blot想一次成功,那幾乎是mission impossible。這么多的環(huán)節(jié),這么多的試劑,往往需要反復(fù)優(yōu)化,才能獲得理想的結(jié)果。然而,一家公司提出了一個很牛的口號,那就是“絕不多跑一次(Never Run a Gel Again)"。這家公司就是ProteinSimple。 
ProteinSimple不像其他公司那樣,對傳統(tǒng)的Western blot進(jìn)行改進(jìn),而是*改造,利用毛細(xì)管電泳將整個過程自動化,創(chuàng)建出Simple Western分析。2011年,這家公司推出了Simon,*臺自動化開展Western blot的儀器。它改變了我們對于Western blot的想象,堪稱蛋白實驗室的“dream machine"。這臺儀器上市后,市場反應(yīng)熱烈。
2014年初,ProteinSimple又推出了三款儀器,分別是Wes、Sally Sue和Peggy Sue。Wes(韋斯)作為經(jīng)濟(jì)的Simple Western儀器,能夠在3小時內(nèi)分析多達(dá)25個樣品。Sally Sue(薩莉?蘇)和Peggy Sue(佩姬?蘇)則是高通量的儀器,每次能夠分析96個樣品。此外,Peggy Sue還能按照電荷分離蛋白,大大節(jié)省樣品的用量。 
這些儀器將所有步驟自動化,包括蛋白分離、免疫雜交、洗滌、檢測以及數(shù)據(jù)分析。你只需將樣品、一抗、二抗和檢測試劑加入微孔板,按下Start就行了。之后的幾小時便由你自由支配?;貋頃r,等著你的就是*分析好的數(shù)據(jù)了。
Simple Western可以兩種方式開展 – 根據(jù)大小或電荷分離蛋白質(zhì)。 
基于大小的分析可在Wes、Peggy Sue或Sally Sue上開展。當(dāng)?shù)鞍籽刂?xì)管內(nèi)一個堆積和分離基質(zhì)遷移時,它們分離。分離后的蛋白固定到毛細(xì)管壁上。之后利用一抗鑒定目標(biāo)蛋白,用HRP結(jié)合的二抗和化學(xué)發(fā)光底物檢測蛋白。系統(tǒng)會自動報告檢測蛋白的分子量和信號。
整個過程不需要手動操作,這大大減少了實驗的可變性,提高了數(shù)據(jù)的重現(xiàn)性和可靠性。據(jù)統(tǒng)計,Western blot的實驗差異性高達(dá)35-45%,而有了這些儀器,差異性能夠控制在15%以下。對于25個樣品的分析,Wes在3小時內(nèi)即可完成。即使是96個樣品,19個小時也能搞定。它們能分離和檢測高達(dá)440 kDa的蛋白,這對研究大蛋白的童鞋來說真是福音。

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