022090 氨基酸脫羧酶試驗(yàn)基礎(chǔ)培養(yǎng)基
(Decarborxylase Medium Base)
用 途:
氨基酸脫羧酶試驗(yàn)基礎(chǔ)培養(yǎng)基供鑒別腸道菌屬能否產(chǎn)生氨基酸脫羧酶用(GB/T4789.4-2008和《中華人民共和國(guó)藥典》2005年版)。
原 理:
蛋白胨和酵母膏粉提供氮源、維生素和生長(zhǎng)因子;葡萄糖為可發(fā)酵糖類;溴甲酚紫為pH指示劑,酸性呈黃色,堿性呈紫色;在基礎(chǔ)培養(yǎng)基加入賴氨酸、和檢測(cè)細(xì)菌是否產(chǎn)生以上底物的酶。
培養(yǎng)基配方(每升):
蛋白胨 5g
酵母膏粉 3g
葡萄糖 1g
溴甲酚紫 0.016g
最終pH 6.8±0.2
使用方法:
1、稱取氨基酸脫羧酶試驗(yàn)基礎(chǔ)培養(yǎng)基9g,加入蒸餾水或去離子水或去離子水1 L,分別加入5g L-氨基酸或10g DL-氨基酸(賴氨酸、或),攪拌加熱煮沸至*溶解后再校正pH。對(duì)照培養(yǎng)基不加氨基酸。分裝試管,每管2.5mL,液面復(fù)蓋約3mm高度液體石蠟。
2、115℃高壓滅菌10min,待冷卻后備用。
3、取待檢菌的新鮮純培養(yǎng)物,分別接種在含有各種氨基酸的培養(yǎng)基內(nèi)(仔細(xì)地通過(guò)培養(yǎng)基內(nèi)的液體石臘層接種在培養(yǎng)基內(nèi))和不含氨基酸的對(duì)照管內(nèi),置36±1℃培養(yǎng)18—24h后作初次觀察,必要時(shí)可延長(zhǎng)至48h。
4、氨基酸脫羧酶陽(yáng)性者由于產(chǎn)堿,培養(yǎng)基呈紫色。陰性者無(wú)堿性產(chǎn)物,但因葡萄糖產(chǎn)酸而使培養(yǎng)基變?yōu)辄S色。對(duì)照管應(yīng)為黃色。
質(zhì)量控制:
下列菌株接種后36±1℃培養(yǎng)18—24h,結(jié)果如下:

注意事項(xiàng):
1、接種前須將各種培養(yǎng)基及對(duì)照管做好標(biāo)記,以免混淆,造成錯(cuò)誤判斷。
2、經(jīng)培養(yǎng)后對(duì)照管必須為黃色,否則氨基酸脫羧酶試驗(yàn)無(wú)效。
3、判斷結(jié)果時(shí),應(yīng)與未接種的培養(yǎng)基進(jìn)行比較,試驗(yàn)管出現(xiàn)任何紫色的痕跡都可判定為陽(yáng)性結(jié)果,培養(yǎng)時(shí)間一般不應(yīng)超過(guò)4d,若時(shí)間過(guò)長(zhǎng),蛋白胨中其他氨基酸可被分解產(chǎn)堿,出現(xiàn)假陽(yáng)性。
4、有時(shí)培養(yǎng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)指示劑被破壞,顏色可能不清楚或消失,可在試管內(nèi)再加溴甲酚紫來(lái)證實(shí)。
貯 存:貯存于避光、陰涼干燥處,用后立即旋緊瓶蓋。貯存期三年。
規(guī) 格:100g
參考文獻(xiàn):
1. GB/T4789.4-2008 中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品衛(wèi)生微生物檢驗(yàn) 沙門(mén)氏菌檢驗(yàn)
2.《中華人民共和國(guó)藥典》2005年版,附錄XI J 微生物限度檢查。