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更新時間：2022-03-19 09:43:10瀏覽次數(shù)：172次
聯(lián)系我時，請告知來自 環(huán)保在線022182四環(huán)素檢定培養(yǎng)基用途：四環(huán)素檢定培養(yǎng)基用于四環(huán)素族殘留的一種微生物學(xué)檢定(GB/T9695.16-88和SN0179-92)
022182 四環(huán)素檢定培養(yǎng)基
用 途：
四環(huán)素檢定培養(yǎng)基用于四環(huán)素族殘留的一種微生物學(xué)檢定(GB/T9695.16-88和SN0179-92)。
原 理：
本法系利用抗生素在瓊脂培養(yǎng)基內(nèi)的擴(kuò)散作用，抑菌圈直徑與抗生素的濃度或活性有關(guān);比較標(biāo)準(zhǔn)品與供試品兩者對接種的試驗菌產(chǎn)生抑菌圈的大小，以測定供試品效價或樣品中四環(huán)素殘留的一種微生物學(xué)方法。
配方(每升)：
胰蛋白胨 6g
牛肉膏粉 1.5g
酵母膏粉 3g
瓊脂 14g
最終pH 5.8±0.1
使用方法(計數(shù)用法)：
1、稱取四環(huán)素檢定培養(yǎng)基24.5g，加入蒸餾水或去離子水1 L，攪拌加熱煮沸至*溶解，分裝三角瓶，121℃高壓滅菌15min。
2、雙碟的制備應(yīng)在無菌室或潔凈室內(nèi)進(jìn)行，并注意避免微生物及抗生素污染。培養(yǎng)基應(yīng)在水浴中或微波爐內(nèi)融化，避免直火加熱。
3、雙碟的底層：用滅菌大口20mL吸管或其它滅菌分裝器，吸取已融化的培養(yǎng)基20mL注入雙碟內(nèi)，待凝固后加入菌層。(雙碟內(nèi)的培養(yǎng)基應(yīng)均勻的分布于平皿內(nèi)。)
4、菌層：取出試驗用菌懸液，按預(yù)試好的加菌量[使0.05單位/mL濃度的四環(huán)素標(biāo)準(zhǔn)溶液可產(chǎn)生12mm以上的清晰、完整的抑菌圈]，用滅菌吸管吸取菌懸液適量，加入已融化并保溫在水浴中(水浴溫度50～60℃)的培養(yǎng)基內(nèi)，搖勻，作為菌層培養(yǎng)基使用。取出加有底層培養(yǎng)基的雙碟，用滅菌大口5mL、10mL吸管或其他適宜分裝器，吸取菌層培養(yǎng)基6mL，加于底層培養(yǎng)基上，使其均勻攤布，等凝固后放置鋼管。
5、放置鋼管：使用鋼管放置器或小子，使鋼管平穩(wěn)的落在培養(yǎng)基上，相應(yīng)劑量的鋼管 對角均勻放置。鋼管放妥后，雙碟靜置5~10分鐘后，再開始滴加抗生素溶液。
6、c滴加抗生素溶液用滅菌毛細(xì)滴管或微量加樣器(調(diào)節(jié)加樣量約為200-300μL)，在滴加之前用溶液洗2~3次。滴加標(biāo)準(zhǔn)品及樣品溶液順序，因?qū)嶒炘O(shè)計方法不同而異。(2.2)法，在雙碟的4個鋼管中分別成“Z"字形滴加標(biāo)準(zhǔn)品及樣品高、低兩種濃度的溶液;在(3.3)法的6個鋼管中間隔3個鋼管中分別滴加標(biāo)準(zhǔn)品及樣品高、中、低3種濃度，并使相同濃度成對角。滴加溶液至鋼管口平滿。
7、滴加完畢，用陶瓦蓋覆蓋雙碟，平穩(wěn)置于雙碟托盤內(nèi)，雙碟疊放不可超過3層，將雙碟托盤水平平穩(wěn)地移入培養(yǎng)箱中間位置，在或該藥品標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的溫度下培養(yǎng)至所需時間。
8、抑菌圈測量：測量前應(yīng)檢查抑菌圈是否圓整，如有破圈或圈不圓整，應(yīng)舍棄該碟?？捎靡志y量儀或游標(biāo)卡尺測量。
質(zhì)量控制：
本品在滅菌后應(yīng)澄清無沉淀，下列菌株接種后30~32℃培養(yǎng)16~18h生長情況如下表：
貯 存：貯存于避光、陰涼干燥處，用后立即旋緊瓶蓋。貯存期三年。
規(guī) 格：100g
參考文獻(xiàn):
1. GB/T9695.16-88 中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn) 肉與肉制品四環(huán)素族抗生素殘留量檢驗
2. SN 0179-92 中華人民共和國進(jìn)出口商品檢驗行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) 出口食品中四環(huán)素族抗生素殘留量檢驗方法
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