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上海酶聯(lián)生物研究所
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閱讀：928發(fā)布時間：2010-06-04
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*試劑的配制方法
基于技術(shù)水平原因，所使用的*絕大部分是國外產(chǎn)品，試劑也絕大部分為*試劑。每測定一份標(biāo)本，儀器所使用的稀釋劑zui少要在20ml以上，另加幾毫升的溶血劑、清潔劑、再加上10%-20%各種耗損，這樣消耗在試劑上的資金就相對很大。另外在試劑訂購、運輸、搬運、儲存方面都給使用單位帶來不小的麻煩。因此我科專門對*的試劑進行研制，經(jīng)臨床運用獲得滿意效果。
1 材料和方法
1.1 材料*、分光光度計、滲透壓儀、pH測量儀、*、色譜儀等。分析儀原裝試劑：稀釋液、溶血劑、清潔劑。過濾盤、NaCL、KCL、Na2HPO4、NaH2PO4、NaHCO3、Na2CO3、草酸銨、NaN3、表面活性劑等等。
1.2 方法 *的測定原理大多為電阻法，因此其所用細(xì)胞稀釋試劑應(yīng)為導(dǎo)電性良好的電解質(zhì)液體。同時也要考慮細(xì)胞的收縮與擴大問題，為了不使細(xì)胞擴大到破裂，液體應(yīng)為等滲或高滲溶液。溶血劑要考慮用什么表面活性劑成分來溶解紅細(xì)胞，并使對環(huán)境污染zui小，且能有效保護白細(xì)胞。清潔劑要考慮用那一種清潔劑清洗*管道，且腐蝕管道可能zui小。查閱、累積儀器測定RBC,WBC,PLT的各種試劑配方，并歸類，這樣容易找出3種試劑的各自關(guān)系和內(nèi)在。運用你能找到的分析儀器和檢測手段，測定你單位的*原裝試劑成分。稀釋液：K+,Na+,Cl-,Ca2+,Mg2+,P,HCO3-等的含量，PH值，滲透壓等。溶血劑：K+,Na+,Cl-,Ca2+,Mg2+,P,HCO3-,Br,NH3,SO32-等的含量，PH值,滲透壓,測定出溶血劑溶解紅細(xì)胞的Hb光譜吸收曲線。清潔劑：K+,Na+,Cl-,Ca2+,Mg2+,P,HCO3-,Br,NH3,SO32-等的含量，PH值,滲透壓等.
1.2.1 試劑配制根據(jù)上面步驟的分析,和累積的試劑配方資料,推算出稀釋液的主要的緩沖體系和濃度并配給適當(dāng)?shù)碾娊赓|(zhì)成分,使配出的試劑在PH,滲透壓、導(dǎo)電性等方面與原裝稀釋液非常相近，而后調(diào)入適當(dāng)?shù)姆栏瘎?。對于溶血劑要判斷出表面活性劑的種類（可通過色譜儀或溶解紅細(xì)胞的Hb吸收曲線幫助判斷）,并通過試驗獲得表面活性劑的濃度.清潔劑用配制好的稀釋液加入適量的相關(guān)表面活性劑或成品洗滌劑構(gòu)成,要考慮對分析儀管道和感應(yīng)器的腐蝕情況.在以上基礎(chǔ)上,根據(jù)滲透壓、PH值和電解質(zhì)逐漸調(diào)整配方,使之與原裝試劑相仿,zui后定下配方,按方配制.
1.2.2 試劑過濾所配試劑的用途為血細(xì)胞分析,過濾設(shè)備應(yīng)比較精細(xì),試劑中的粒子直徑應(yīng)小于0.5um這樣才能測定血小板,以達(dá)到測定血小板的準(zhǔn)確性.
1.2.3 試劑分裝根據(jù)需要B將各種試劑按不同的容量分裝,以便使用和運輸.
2 結(jié)果 按以上方法和步驟配制出的試劑B能夠保證與分析儀測定參數(shù)相匹配,保證細(xì)胞脈沖結(jié)果一致性和穩(wěn)定性,使自配試劑在Hb吸收光譜、WBC對比分類對照、相關(guān)性方面均有滿意結(jié)果，參見文獻。自配*試劑在成分、基本理化指標(biāo)與該儀器原配試劑基本一致狀況下，自配試劑可替代進口*試劑運用于進口*。
3 討論 根據(jù)血細(xì)胞分析測定原理,配制出的稀釋液、溶血劑、清潔劑在導(dǎo)電性能、滲透壓、PH等理化性質(zhì)方面都與*試劑相仿,且無損壞*管道系統(tǒng),感應(yīng)系統(tǒng)的化學(xué)成分,就不會對*造成損壞;再則現(xiàn)在試劑供應(yīng)商提供的試劑，也不能保證全都是*試劑，自我配制的試劑，已出現(xiàn)在供銷市場，在這種情況下應(yīng)當(dāng)自己給自己一個機會，運用自己的知識，發(fā)揮自己的才干，找出*幾種試劑的內(nèi)在，從簡單的稀釋液入手，逐漸找到配制試劑的方法和信心，再順序進入溶血劑的配制，清潔劑的調(diào)配，找出合適的防腐劑。在解決一個一個的問題后，會出現(xiàn)創(chuàng)造和開發(fā)的快感，同時也為你所在的集體，解決了試劑訂購、運輸、搬運、儲存方面的困難。又節(jié)約了大量的資金,并且配制的試劑,在分析儀上使用,無需調(diào)整儀器測定狀態(tài)而直接運用.
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