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上海酶聯(lián)生物研究所
閱讀:178發(fā)布時間:2012-09-07
上海酶聯(lián)生物研究所
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人*βELISA檢測試劑盒
本試劑僅供研究使用 標本:血清或血漿
試驗原理:
Thymosin-β試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知Thymosin-β濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將Thymosin-β和*標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中Thymosin-β的濃度呈比例關系。
安全性
避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
人*βELISA檢測試劑盒
操作注意事項
試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
樣品收集、處理及保存方法
血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人*βELISA檢測試劑盒
操作步驟
使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內。
加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的*標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
在450nm波長處測定各孔的OD值。
6號標準品以上的結果為非線性的,根據此標準曲線無法得到的結果。
試劑盒性能
1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。
2. 特異性:不與其它細胞因子反應。
3. 重復性:板內、板間變異系數均小于10%。
人*βELISA檢測試劑盒
結 果 判 斷 與 分 析
1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的Thymosin-β標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的Thymosin-β含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。
3、檢測值范圍:0-40nmol/L
4、敏感度: 0.1 nmol/L
RAMP-1 受體活性修飾蛋白1抗體 0.2ml
PRMT1(protein arginine methyltransferase 1) 蛋白質*甲基轉移酶1抗體 0.2ml
PRCP(prolylcarboxypeptidase) 脯氨酰羧肽酶抗體 0.2ml
pig IgG/FITC 熒光素標記豬IgG 0.3ml
pig IgM/FITC 熒光素標記豬IgM 0.3ml
Mink IgG/FITC 熒光素標記水貂IgG 0.3ml
Rabbit IgG/FITC 熒光素FITC標記兔IgG(細胞流式同型對照) 0.3ml
Rabbit IgM/FITC 熒光素標記兔IgM 0.3ml
PRDX3(peroxiredoxin 3) 過氧化還原酶3抗體 0.2ml
RRM1(ribonucleotide reductase R1 mRNA) 抗核糖核苷酸還原酶1抗體 0.2ml
PRL (Prolactin) 鼠抗人泌乳素抗體 0.2ml
PRL-2(Protein tyrosine phosphatase type IV A protein 2) 肝再生磷酸酯酶2抗體 0.2ml
PH-4/P4H-TM(proline 4-hydroxylase) *水解酶4抗體 0.2ml
PHD3 (Egln3; HIF-prolyl hydroxylase 3;) *羥化酶抗體 0.2ml
Goat anti-chi IgG/FITC 熒光素標記羊抗雞IgG 0.3ml
Goat anti-chi IgM/FITC 熒光素標記羊抗雞IgM 0.3ml
Rb FITC/FITC 熒光素標記兔抗FITC 0.3ml
PS-1 (Presenilin-1/S182)(NT) 早老素蛋白-1抗體 0.2ml
PS-1(Presenilin-1/S182)(CT) 早老素蛋白-1抗體 0.2ml
PSA (Prostate specific antigen) for conjugation and detection 鼠抗人前列腺特異性抗原抗體 0.2ml
PSAP/PAP(Prostate Specific Acidic Phosphatase) 前列腺酸性磷酸酶抗體 0.2ml
PSCA (Prostate Stem Cell gen) 抗前列腺干細胞抗原抗體 0.2ml
PSD-95 突觸后密度蛋白95抗體 0.1ml
PSD-95 突觸后密度蛋白95抗體 0.2ml
PSGL-1/CD162(P-selectin glycoprotein ligand 1) P選擇素糖蛋白配體1抗體 0.2ml
Goat anti-human IgG/FITC 熒光素標記羊抗人IgG 0.3ml
Goat anti-human IgM/FITC 熒光素標記羊抗人IgM 0.3ml
商鋪:http://m.kytsldc.cn/st32881/
主營產品:ELISA試劑盒,人ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒,豚鼠ELISA試劑盒,兔ELISA試劑盒,羊ELISA試劑盒,牛ELISA試劑盒,雞ELISA試劑盒,鴨ELISA試劑盒,植物ELISA試劑盒
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