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上海酶聯(lián)生物研究所
上海酶聯(lián)生物研究所
閱讀：441發(fā)布時間：2011-10-13
內皮抑素（endostatin） 是目前作用zui強、實驗效果的腫瘤血管生成抑制劑,近年來倍受關注,目前在美國已進行Ⅰ期和Ⅱ期臨床試驗,并有可能成為新一代抗腫瘤藥物。
內皮抑素的結構特點如下：
內皮抑素是1997 年O’Reilly 等從培養(yǎng)的小鼠內皮細胞瘤（ EOMA） 上清中分離純化的一種內源性血管生成抑制劑,為20 kd 分子量蛋白質。氨基酸序列分析顯示:內皮抑素為膠原18 分子C 末端部分,共184 個氨基酸。在體液（血清、尿液） 中也可分離出天然內皮抑素分子。內皮抑素是膠原18 的降解產物,降解過程至少包括兩步酶解,參與酶解的可能有彈性蛋白酶、組織蛋白酶L 和基質金屬蛋白酶。進一步晶體結構分析發(fā)現(xiàn):內皮抑素結構表面有一由11 個*殘基組成的堿性區(qū)域,為肝素結合位點,這解釋了內皮抑素對肝素的高親和力特性,也可能是通過該區(qū)域與血管生成因子競爭結合肝素,起到抑制血管生成作用。但也有研究表明內皮抑素與血管壁的結合不依賴于肝素結合位點,且與FGF - 2 無競爭性抑制作用 。此外,在內皮抑素序列中發(fā)現(xiàn)由其N 端第1 ,3 ,11 位3 個*及第76 位的天冬氨酸殘基組成的鋅離子結合位點,鋅與內皮抑素的N 端環(huán)繞形成一個二聚體結構。zui初認為內皮抑素與鋅離子結合對其抗血管生成活性很重要,但后來通過基因修飾方法去除鋅離子結合位點的研究表明,內皮抑素抑制內皮細胞的遷移及腫瘤的生長并不依賴鋅離子結合位點。
內皮抑素的生物學功能：
1 內皮抑素對血管內皮細胞的抑制作用 內皮抑素能特異性抑制血管內皮細胞在bFGF 誘導下的增殖,抑制內皮細胞的遷移,誘導內皮細胞凋亡,但對非內皮細胞,如平滑肌細胞、3T3 成纖維細胞、Lewis 肺癌細胞等均無抑制作用[5] 。Kim 等研究也證明,內皮抑素能抑制人臍靜脈內皮細胞穿透人工基底膜的能力,且與抑制效果呈劑量依賴關系。
2 內皮抑素對血管生成的抑制作用
目前,多種實驗都能證實內皮抑素對生長的血管產生抑制作用,而對靜止的血管組織不起作用。O’Reilly 等[1] 通過雞胚絨毛尿囊膜（CAM） 實驗,用大腸桿菌或桿狀病毒表達的內皮抑素均顯示出對雞胚血管生成有明顯抑制作用,且未見毒性反應。Bloch 等[7]研究證明內皮抑素并不影響小鼠傷口愈合、傷口收縮、傷口感染及傷口上皮再生,但能減少肉芽組織的形成。Yin 等[8]將攜帶內皮抑素基因的重組慢病毒注入由TNF 誘導的小鼠初期類風濕性關節(jié)炎的關節(jié)內,結果顯示內皮抑素可抑制關節(jié)內血管生成及血管翳的形成,減緩類風濕性關節(jié)炎的進展。說明內皮抑素不僅可以抑制腫瘤血管新生,對病理性血管性炎癥也有抑制作用。
3 內皮抑素對腫瘤生長和轉移的抑制作用
國內外許多學者利用重組內皮抑素蛋白或通過內皮抑素基因治療實驗表明,內皮抑素對多種實體瘤的生長和轉移都能產生抑制作用。Bohen 用鼠重組內皮抑素幾乎*抑制小鼠Lewis 肺癌、黑素瘤、纖維素瘤、血管內皮瘤、腎細胞癌等原發(fā)灶腫瘤的生長,治療6 周期后腫瘤進入休眠期,停藥后腫瘤無復發(fā),且未見轉移灶發(fā)生,不產生耐藥性。同時在細胞水平,也有實驗證明內皮抑素能抑制腫瘤細胞在人工基底膜凝膠中的遷移 。Perletti 等利用二甲基苯并蒽（DMBA） 誘發(fā)的大鼠乳腺癌動物模型, 連續(xù)4 周每天皮下注射內皮抑素20mg/ kg ,使腫瘤停藥后4 周仍處于休眠狀態(tài),表明內皮抑素對原發(fā)腫瘤也有明顯抑制作用。
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