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上海酶聯(lián)生物研究所
上海酶聯(lián)生物研究所
閱讀：1114發(fā)布時間：2010-10-13
弓形蟲?。╰oxoplasma）是由剛地弓形蟲引起的人畜共患的傳染病，具有廣泛的自然疫源性，很多哺乳動物和鳥類均可罹患此病。弓形蟲侵襲人體可導致弓形蟲感染和弓形蟲病，后者專指有臨床表現(xiàn)和活動性感染的病理學改變。人體弓形蟲感染多為隱性感染，但抵抗力低下時，則可出現(xiàn)嚴重的臨床癥狀。先天性感染常致胎兒畸形、死胎及流產(chǎn)。
[病因?qū)W] 弓形蟲生活史包括有性生殖和無性生殖2個階段，全過程需兩種宿主——終末宿主（貓及貓科動物）和中間宿主（其他動物或人體內(nèi)）。弓形蟲發(fā)育全過程有5種不同形態(tài)：即滋養(yǎng)體、包囊、裂殖體、配子體和卵囊。
貓食人弓形體卵囊或包囊后，在腸腔分別釋放出子孢子和滋養(yǎng)體，并侵入小腸上皮細胞進行裂體增殖，部分裂殖子發(fā)育為雌雄配子體，兩者結(jié)合為合子，發(fā)育為卵囊，隨貓糞排出體外。
人食人弓形體卵囊或吞食包囊后，在腸內(nèi)逸出子孢子、緩殖子或速殖子，隨即侵入腸壁經(jīng)血或淋巴進入單核吞噬細胞系統(tǒng)寄生，并擴散至全身各器官組織的實質(zhì)細胞內(nèi)繁殖，導致細胞破裂，引起各種急性病癥。在免疫功能正常的機體，部分速殖子侵入宿主細胞后，特別是腦、眼、骨骼肌的蟲體繁殖速度減慢，并形成包囊，包囊在宿主體內(nèi)可存活數(shù)月、數(shù)年，甚至終身不等。當機體免疫功能低下或長期應(yīng)用免疫抑制藥時，組織內(nèi)的包囊可破裂，釋出緩殖子，進入血流和其他新的組織細胞繼續(xù)發(fā)育繁殖。
速殖子期是弓形蟲的主要致病階段，以其對宿主細胞的侵襲力和在有核細胞內(nèi)*的內(nèi)二芽殖法增殖破壞宿主細胞。蟲體逸出后又重新侵入新的細胞，刺激淋巴細胞、巨噬細胞的浸潤，導致組織的急性炎癥和壞死。
包囊內(nèi)緩殖于是引起慢性感染的主要形式，包囊因緩殖子增殖而體積增大，擠壓器官，使功能受到障礙。包囊增大到一定程度，可因多種因素而破裂。游離的蟲體可刺激機體產(chǎn)生遲發(fā)性變態(tài)反應(yīng)，并形成肉芽腫病變，后期的纖維鈣化灶多見于腦、眼部等。宿主感染弓形蟲后，在正常情況下，可產(chǎn)生有效的保護性免疫，多數(shù)無明顯癥狀，當宿主有免疫缺陷或免疫功能低下時才引起弓形蟲病，即使在隱性感染，也可導致復發(fā)或致死的播散性感染；近幾年有報道艾滋病患者因患弓形蟲腦炎而致死。
[實驗室診斷]
特異性檢查
（1）涂片檢查。
（2）動物接種分離法。
（3）血清學檢查。
（4）分子生物學診斷。
[結(jié)果分析與判斷]
1．涂片檢查 取急性期患者的體液、腦脊液、血液、骨髓、羊水、胸水經(jīng)離心后，沉淀物作涂片，或采用活組織穿刺物涂片，經(jīng)姬姆薩染色后，顯微鏡下檢查出弓形蟲滋養(yǎng)體即可確診。此法簡便，但陽性率不高、易漏檢。此外也可切片用免疫酶或熒光染色法，觀察特異性反應(yīng)，可提高蟲體的檢出率。
2．動物接種分離法 動物接種分離法或細胞培養(yǎng)法查找滋養(yǎng)體。采用敏感的實驗動物小白鼠，樣本接種于腹腔內(nèi)，1周后剖殺取腹腔液顯微鏡檢查，陰性需盲目傳代至少3次；樣本亦可接種于離體培養(yǎng)的單層有核細胞。動物接種和細胞培養(yǎng)是目前常用的病原查診方法。
3．血清學檢查 由于弓形蟲病原學檢查存在不足，血清學檢查成為廣泛應(yīng)用的診斷手段。方法種類較多，主要有以下4種。
（1）染色試驗：為經(jīng)典的特異血清學方法，采用活滋養(yǎng)體在有致活因子的參與下與樣本內(nèi)特異性抗體作用，使蟲體表膜破壞不為著色劑美藍所染。顯微鏡檢查見蟲體不被藍染者為陽性，蟲體多數(shù)被藍染者為陰性。
（2）IHA：此法特異、靈敏、簡易，適用于流行病學調(diào)查及篩查性抗體檢測，應(yīng)用廣泛。
（3）間接免疫熒光抗體試驗：以整蟲為抗原，采用熒光標記的第2抗體檢測特異抗體。此法可測同型及亞型抗體，其中檢測IgM適用于臨床早期診斷。
（4）ELISA：用于檢測宿主的特異循環(huán)抗體或抗原，已有多種改良法廣泛用于早期急性感染和先天性弓形蟲病的診查，這種方法的靈敏度可檢出抗原量為0．5ug/L
4．分子生物學診斷 近年來將PCR及DNA探針技術(shù)應(yīng)用于檢測弓形蟲感染，更具有靈敏、特異、早期診斷的意義，目前已開始試用于臨床。
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