液相色譜儀工作流程圖（原理）
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現(xiàn)在的液相色譜儀一般都做成一個個單元組件，然后根據(jù)分析要求將各所需單元組件組合起來。zui基本的組件是高壓、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器和數(shù)據(jù)系統(tǒng)（記錄儀、積分儀或色譜工作站）。此外，還可根據(jù)需要配置流動相在線脫氣裝置、梯度洗脫裝置、自動進(jìn)樣系統(tǒng)、柱后反應(yīng)系統(tǒng)和全自動控制系統(tǒng)等。圖8-1是具有基本配置的液相色譜儀的工作流程圖。
液相色譜儀的工作過程：將流動相以穩(wěn)定的流速（或壓力）輸送至分析體系，在色譜柱之前通過進(jìn)樣器將樣品導(dǎo)入,流動相將樣品帶入色譜柱,在色譜柱中各組分因在固定相中的分配系數(shù)或吸附力大小的不同而被分離，并依次隨流動相流至檢測器，檢測到的信號送至數(shù)據(jù)系統(tǒng)記錄、處理或保存。圖8-1是具有基本配置的液相色譜儀工作流程圖：
進(jìn)樣器
從液相色譜儀工作流程圖看出，進(jìn)樣器是將樣品溶液準(zhǔn)確送入色譜柱的裝置，分手動和自動兩種方式。
進(jìn)樣器要求密封性好，死體積小，重復(fù)性好，進(jìn)樣時引起色譜系統(tǒng)的壓力和流量波動要很小。現(xiàn)在的液相色譜儀所采用的手動進(jìn)樣器幾乎都是耐高壓、重復(fù)性好和操作方便的六通閥進(jìn)樣器，其原理與氣相色譜中所介紹的相同。
色譜柱
1. 色譜柱的構(gòu)成
從液相色譜儀工作流程中看到，色譜柱是實(shí)現(xiàn)分離的核心部件，要求柱效高、柱容量大和性能穩(wěn)定。柱性能與柱結(jié)構(gòu)、填料特性、填充質(zhì)量和使用條件有關(guān)。
色譜填料：經(jīng)過制備處理后，用于填充色譜柱的物質(zhì)顆粒，通常是5-10粒徑的球形顆粒。
色譜柱管： 內(nèi)部拋光的不銹鋼管。典型的液相色譜分析柱尺寸是內(nèi)徑4.6mm，長250mm。
色譜柱： 也稱固定相，是將色譜填料填充到色譜柱管中所構(gòu)成的,其結(jié)構(gòu)如圖8-8所示。
2. 色譜柱的填充
干法填充：在硬臺面上鋪上軟墊，將空柱管上端打開垂直放在軟墊上，用漏斗每次灌入50-100mg填料，然后垂直臺面墩10-20次。
濕法填充： 又稱淤漿填充法，使用專門的填充裝置（圖8-9）。
數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)與自動控制單元
數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)：又稱色譜工作站。它可對分析全過程（分析條件、儀器狀態(tài)、分析狀態(tài)）進(jìn)行在線顯示，自動采集、處理和儲存分析數(shù)據(jù)。一些配置了積分儀或記錄儀的老型號液相色譜儀在很多實(shí)驗(yàn)室還在使用，但近年新購置的色譜儀，一般都帶有數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，使用起來非常方便。
自動控制單元：將各部件與控制單元連接起來，在計算機(jī)上通過色譜軟件將指令傳給控制單元，對整個分析實(shí)現(xiàn)自動控制，從而使整個分析過程全自動化。也有的色譜儀沒有設(shè)計專門的控制單元，而是每個單元分別通過控制部件與計算機(jī)相連，通過計算機(jī)分別控制儀器的各部分。
《液相色譜儀工作流程圖》由南京科捷分析儀器有限公司技術(shù)部提供。
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