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  • ELISA檢測(cè)血清的詳細(xì)留意事項(xiàng)

    大部分elisa檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血清標(biāo)本可按慣例方法收集,應(yīng)留意防止溶血,紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為符號(hào)的ELISA測(cè)定中,溶血標(biāo)本可能會(huì)添加非特異性顯色。血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)。如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)發(fā)生假陽(yáng)性反應(yīng)。一般說(shuō)來(lái),在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃。超越一周測(cè)定的需-20℃保存。凍住血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,散布不均,應(yīng)充沛混勻并防止發(fā)生氣泡?;鞚峄蛴谐练e的血清標(biāo)本應(yīng)先離心或過(guò)濾,弄清后再檢測(cè)。重復(fù)凍融會(huì)使抗體效價(jià)下跌,所
  • 人生存素(survivin)ELISA試劑盒使用說(shuō)明書(shū)

    本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍:96T10ng/L-260ng/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中生存素(survivin)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人生存素(survivin)水平。用純化的人生存素(survivin)體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入生存素(survivin),再與HRP標(biāo)記的生存素(survivin)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)che底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色
  • 想要的ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果為什么不一致?

    絕大多數(shù)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)人員頭疼的問(wèn)題,莫過(guò)于試驗(yàn)成果不抱負(fù)。其實(shí)做科研試驗(yàn),就是這樣在不斷探究中尋求真理。很難有人可以的試驗(yàn)成功。可是,我在做試驗(yàn)過(guò)程中可以盡量防止哪些常犯的過(guò)錯(cuò)呢?jin天讓我們一同來(lái)看一下,影響ELISA試驗(yàn)成果不抱負(fù)的原因有哪些?操作應(yīng)對(duì)試驗(yàn)的物理參數(shù)有充沛的了解,如環(huán)境溫度(保持在18c~25℃)、反響孵育溫度和孵育時(shí)刻、洗刷的次數(shù)等,要先查看水育箱溫度,是否符合要求。2.正確運(yùn)用加樣器加樣器應(yīng)筆直參加標(biāo)本或試劑,ELISA試劑盒防止刮擦包被板底部。加樣過(guò)程中防止液
  • ELISA實(shí)驗(yàn)操作秘籍

    如何利用ELISA篩選以及ELISA方法操作的注意事項(xiàng)有哪些呢?相信很多做實(shí)驗(yàn)的小伙伴都有這樣的疑問(wèn),今天小編就給大家總結(jié)一下,注意聽(tīng)講哦!ELISA,全稱酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn),主要利用的是抗原抗體特異性結(jié)合的特點(diǎn),可分為直接法、間接法、雙抗體夾心法、競(jìng)爭(zhēng)法等。下面以間接法為例進(jìn)行介紹:1、方陣ELISA。用途:①融合前后確定鼠血清中抗體效價(jià);②拿到單抗腹水后,需要建立ELISA方法時(shí)首先要確定包被原及抗體的優(yōu)質(zhì)工作濃度。經(jīng)典的方陣ELISA:將抗原和抗體各自稀釋成不同梯度濃度,結(jié)果OD值P/N2的
  • 人葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD) ELISA試劑盒使用說(shuō)明書(shū)

    本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍:96T10ng/L-360ng/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD)水平。用純化的人葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD),再與HRP標(biāo)記的葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)CHE底洗滌后加底物TM
  • 手工洗板與自動(dòng)洗板之差異

    在Elisa酶聯(lián)免疫試劑盒試驗(yàn)中,洗板是非常重要的過(guò)程。酶聯(lián)免疫試驗(yàn)(ELISA)洗滌過(guò)程雖不是一個(gè)反應(yīng)過(guò)程,但卻也決定著實(shí)驗(yàn)的成敗?。ELISA就是通過(guò)洗滌來(lái)達(dá)到分離游離和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的,通過(guò)洗滌以清除殘留在微孔板中未能與固相抗原或抗體相結(jié)合的物質(zhì),以及在反應(yīng)過(guò)程中的非特異性吸附于固相載體上的干擾物質(zhì)。聚苯乙烯對(duì)蛋白質(zhì)的吸附是普遍的,在ELISA測(cè)定的反應(yīng)過(guò)程中應(yīng)盡量避免非特異性吸附,洗滌時(shí)又應(yīng)將這些非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌掉。由于“ELISA檢測(cè)試劑盒”具有的特異性,抗原抗體的結(jié)合發(fā)
  • ELISA實(shí)驗(yàn)要點(diǎn):洗滌是關(guān)鍵

    優(yōu)化ELISA的重點(diǎn)之一在于洗滌。洗滌步驟可降低未結(jié)合抗體所引起的背景信號(hào),從而增加分析的信噪比。每一步之間的洗滌確保只有特異的結(jié)合事件被保留,在最后一步產(chǎn)生信號(hào)。而不充分的洗滌會(huì)導(dǎo)致差異和高背景,從而帶來(lái)不理想的結(jié)果。本文將為你介紹一些利用自動(dòng)洗板機(jī)來(lái)洗滌ELISA平板的技巧。免疫分析,比如ELISA,一般包含兩個(gè)或以上的孵育步驟,中間以洗滌隔開(kāi)。ELISA通常在96孔板中開(kāi)展,其上包被了結(jié)合抗原或抗體。在封閉步驟后,包被后的平板首先與一抗或抗原孵育。隨后通過(guò)一些洗滌步驟去除未結(jié)合(低親和力)
  • 雞傳染性支氣管炎(IBV)ELISA試劑盒--定性 說(shuō)明書(shū)

    本試劑盒僅供研究使用。使用目的:本試劑盒用于測(cè)定雞血清,血漿及相關(guān)液體樣本中傳染性支氣管炎(IBV)表達(dá)。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中雞傳染性支氣管炎(IBV)表達(dá)。用純化的傳染性支氣管炎(IBV)抗體包被微孔板,制成固相抗體,可與樣品中傳染性支氣管炎(IBV)相結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗原和其他成分后再與HRP標(biāo)記的傳染性支氣管炎(IBV)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)che底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。
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