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在微生物學(xué)、環(huán)境科學(xué)、分子生物學(xué)、毒理學(xué)、酶學(xué)、疫苗制備、藥品生產(chǎn)等等領(lǐng)域的實驗過程中，都需要應(yīng)用各種細菌，儲備標準菌種、參考菌種、特殊菌種是bi不可少的，下面就給大家介紹幾種實驗室菌株的保存方法。
1.斜面低溫保存法
將分純的待存菌接種于適宜的固體斜面培養(yǎng)基上，得到充分生長后，用封口膜封口，貼上標簽，保存于4℃的冰箱中。此法操作簡單、使用方便、不需要特殊設(shè)備，是實驗室菌種保存zui常用的方法。但保存時間短，一般每個月都要移種1次，而且菌種容易變異，所以此方法只適合實驗室短期實驗菌株的保存。
2.半固體瓊脂法
用接種針將以分純的待存菌，穿刺接種于半固體中，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)后取出，封上無菌的液體石蠟，貼上標簽，放4℃冰箱保存。此方法簡便易操作，不需特殊設(shè)備、技術(shù)難度不大，但保存的時間不長，一般只能保存1年以內(nèi)，而且對抵抗力弱以及一些特殊菌種大概只能存活3～6個月，需要頻繁的傳代，這樣很容易使菌株受到污染、變異。所以此方法不適用菌種的長期保存，只適合實驗室一些要求不高的菌種的短期保存。
3.液體石蠟保存法
將液體石蠟滅菌，放于37℃恒溫箱中，使水汽蒸發(fā)掉備用。再將已分純的待存菌在最適宜的斜面培養(yǎng)基中培養(yǎng)，使得到健壯的菌體，用無菌吸管吸取已滅菌的液體石蠟，注入已長好的斜面培養(yǎng)基上，用量以高出斜面1cm為準，將試管直立，貼上標簽，置4℃下保存。此法制作簡單，不需要特殊設(shè)備，菌種可以保存1年左右不需要經(jīng)常移種，缺點是保存的時候需要直立放置。此方法適合實驗室短期菌株的保存，而且保存時需要一定的空間。
4.高層半固體瓊脂石蠟保存法
將待存菌經(jīng)平板劃線分離后，挑單個菌落用接種針反復(fù)穿刺接種到高層半固體瓊脂培養(yǎng)基中，經(jīng)培養(yǎng)箱培養(yǎng)后取出，用滅菌過的液體石蠟滴加到半固體瓊脂菌種管表層約0.5cm高度，貼上標簽，存放4℃冰箱。此法操作簡便，不需要特殊設(shè)備，效果好，可以保存菌株1～2年。（此法適合較長時期的保存）
5.紙片法
將已分純的待存菌用無菌鑷子鑷取紙片，在紙片上刮取4～5個菌落，放入凍存管內(nèi)，蓋上蓋子后用封口膠布封住邊緣，貼上標簽，放入冰箱冷凍保存（-20℃左右）。此法操作簡單、不需特殊設(shè)備、經(jīng)濟實用、保存空間小等，而且保存時間至少2年，但對一些營養(yǎng)要求比較高的菌種，存活率不理想。所以此方法適合實驗室一些營養(yǎng)要求不高的菌種較長時間的保存。
6.甘油液保存法
將已分純的待存菌接種于肉湯中，37℃培養(yǎng)18～24h，然后按5份肉湯溶液、2份甘油生理鹽水保存液的比例分裝于滅菌的微量離心管或細胞凍存管中，貼上標簽，置-80℃~-20℃冰箱保存。此法操作簡便，不需特殊設(shè)備，效果好，可以保存菌種3年左右，無變異現(xiàn)象，而且此方法還可以保存一些要求較高的特殊菌種，適用范圍廣。（此法適合較長時間的保存）
7.濕牛奶凍存法
將待存菌種于各自生長良好的平板培養(yǎng)基上，經(jīng)分純后放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。用準備好的保護劑牛奶洗下菌苔，再用無菌毛細滴管吸取菌懸液滴入菌種管球部，每管球部約有一半的菌液，之后火焰封口，貼上標簽，保存于-20℃冰箱。此法操作較簡便，不需特殊設(shè)備、不需要花費很多時間，而且保存時間大約3年，時間較長不易變性，也不易污染。（此法適合較長時間的保存）
8.蒸餾水保存法
取滅菌蒸餾水6~7ml加于已接待存菌斜面培養(yǎng)基的試管內(nèi)，用吸管研磨，洗下斜面上的菌苔，充分混勻，將此菌液分裝于滅菌的螺旋小瓶中，或用膠塞密封，貼上標簽，置于4℃保存。此法制作簡單，不需要特殊設(shè)備，且不需要經(jīng)常移種，而且可以保存數(shù)年，但要注意保存的時候需要直立放置。（此法適合具有條件的實驗室較長時間的保存）
9.冷凍真空干燥法
將待存菌分純后，用準備好的保護劑牛奶洗下菌苔，把菌懸液滴入菌種管后，在管口抽取少許棉花塞入管內(nèi)xi頸處，放入冰箱-40℃速凍40min，放入準備好的混有鹽的冰中，接上真空泵，真空抽干呈粉末狀，火焰封口，貼上標簽，保存于-40℃冰箱。此法保存時間長，可達15年，不易變性，但需要儀器，一般實驗室難以配備，而且過程復(fù)雜，操作難度大，需要較長時間才能完成。
綜上所述，我們在做實驗的過程中或者短期保存菌種時，可以選擇斜面低溫保存法、半固體瓊脂法、液體石蠟保存法、高層半固體瓊脂石蠟保存法、紙片法，進行保存；如果需要較長時間的保存菌株，可以選擇甘油液保存法、濕牛奶凍存法、蒸餾水保存法、冷凍真空干燥法保存菌株，其中冷凍真空干燥法需要實驗室配備相應(yīng)的儀器設(shè)備。如果一些菌株營養(yǎng)要求比較高的話，可以選擇甘油液保存法、冷凍真空干燥法保存。當然上述菌株保存的方法也只是一部分zui方便的保存方法，還有更多的方法需要我們不斷的探索和研究。
