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細胞
培養(yǎng)基
生化試劑
酶聯(lián)免疫elisa試劑盒
NF-KB檢測試劑盒
原代細胞
PCR試劑盒
RNA/DNA提取
血清
ATCC細胞
質(zhì)粒
細胞系

人丙二醛Elisa試劑盒操作步驟

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人丙二醛Elisa試劑盒操作步驟

標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

8mmol/L

5號標(biāo)準(zhǔn)品

50μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入50μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

4 mmol/L

4號標(biāo)準(zhǔn)品

50μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入50μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

2 mmol/L

3號標(biāo)準(zhǔn)品

50μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入50μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

 mmol/L

2號標(biāo)準(zhǔn)品

50μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入50μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

0.5 mmol/L

號標(biāo)準(zhǔn)品

50μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入50μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品0μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。 
溫育：操作同3。
洗滌：操作同5。
顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色5分鐘.
終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后5分鐘以內(nèi)進行。

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