放免試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠白介素6(IL-6)水平。用純化的大鼠白介素6(IL-6)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入白介素6(IL-6)，再與HRP標(biāo)記的白介素6(IL-6)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白介素6(IL-6)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中大鼠白介素6(IL-6)濃度。
大鼠白介素6試劑盒操作步驟
. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品0μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。  
4. 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
5. 放免試劑盒洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃
避光顯色5分鐘.
0. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后5分鐘以內(nèi)進行。
保存條件及有效期
．試劑盒保存：；2-8℃。
2．大鼠白介素6(IL-6)試劑盒有效期：6個月
黃花菜木脂素A    含量:    ≥95%    Cleomiscosin A    進口，*
黃芪皂苷-Ⅰ    含量:    ≥98%    AstragalosideⅠ    進口/國產(chǎn)
黃芪皂苷-Ⅱ    含量:    ≥98%    Astragaloside -Ⅱ    現(xiàn)貨供應(yīng)
黃芪皂苷-Ⅲ    含量:    ≥98%    Astragaloside -Ⅲ    *
假荊芥屬苷    含量:    >96%    Nepetin-7-glucoside    進口/國產(chǎn)
梔子苷    含量:    ≥98%    Geniposide    現(xiàn)貨供應(yīng)
放免試劑盒