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分析ELISA測定中影響測定成敗Z為關(guān)鍵的一個(gè)因素

時(shí)間：2017/4/20閱讀：832

TSZ Elisa試劑盒溫育這一步是臨床ELISA測定中zui容易出現(xiàn)問題的步驟。通常目前國內(nèi)ELISA商品試劑盒的反應(yīng)溫育時(shí)間為37℃ 30分鐘～小時(shí)，進(jìn)口ELISA試劑盒則通常為37℃ ～2小時(shí)才能有較*的結(jié)合，低于小時(shí)，可能會(huì)影響測定下限。因此，關(guān)于溫育，在實(shí)際測定操作中一定要注意以下幾點(diǎn)：

要保證在設(shè)定的溫度下有足夠的反應(yīng)時(shí)間。一般來說，加完樣本和/或反應(yīng)試劑后，將微孔板從室溫拿至水浴箱或溫箱中時(shí)，孔內(nèi)溫度從室溫升至37℃，需要一定的時(shí)間，尤其是在室溫比較低以及非水浴的狀態(tài)下，這段升溫時(shí)間可能還比較長，而在臨床實(shí)驗(yàn)室中，很少有人注意這個(gè)問題，TSZ Elisa試劑盒通常是將微孔板一放入溫箱即開始計(jì)時(shí)，這樣就很容易造成實(shí)際測定中溫育時(shí)間不夠，弱陽性樣本測不出來的問題。曾有一地處南方的血站同行提出了一個(gè)問題，就是在每一年的冬季總有那么一個(gè)多月的時(shí)間，在做HAg測定的室內(nèi)質(zhì)控中，測定由衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心供應(yīng)的 ng/ml弱陽性樣本時(shí)，總是測不出來，不知原因?yàn)楹?？這可能就與南方冬天室內(nèi)溫度較低有關(guān)，此時(shí)微孔板轉(zhuǎn)入溫箱后37℃溫育時(shí)間不夠，以致弱陽性樣本測定為陰性。因此，為保證37℃下足夠的溫育時(shí)間，臨床實(shí)驗(yàn)室可自行確定本實(shí)驗(yàn)室不同季節(jié)(不同室溫下)微孔板從室溫拿至溫箱后需要多長時(shí)間孔內(nèi)溫度才能達(dá)到37℃，從而適當(dāng)延長板條在溫箱中的放置時(shí)間。具體的做法是，用一小溫度計(jì)放置板孔反應(yīng)溶液醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)中測量觀察TSZ Elisa試劑盒即可。

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