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總結(jié)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中的失誤

時(shí)間：2016/5/26閱讀：868

　　.實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)掌握實(shí)驗(yàn)室基本操作具備基本素質(zhì)和具有一定的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)?？梢允炀毷褂脤?shí)驗(yàn)儀器、器械，善于總結(jié)和分析問題，對(duì)于實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的意外情況能穩(wěn)重妥善解決。

　　2.在操作前必須仔細(xì)閱讀說明書，嚴(yán)格按照說明書要求進(jìn)行規(guī)范操作，不同批號(hào)的試劑千萬不能混用。在反復(fù)試驗(yàn)確定成立后方可改進(jìn)。

　　3.必須嚴(yán)格控制反應(yīng)時(shí)間，如果反應(yīng)時(shí)間過長(zhǎng)，酶會(huì)失有可能造成假陰性。

　　4.評(píng)估試劑的實(shí)用性，試劑是否穩(wěn)定，對(duì)準(zhǔn)確率的高低到頭重要。在使用試劑前，應(yīng)進(jìn)行陰、陽對(duì)照及樣品反復(fù)比照試驗(yàn)，判定試劑符合要求后方可使用。

　　5.使用校對(duì)過的微量移液器可以排除自然誤差，移液器準(zhǔn)確與否對(duì)定量檢測(cè)尤為重要。

　　6.加樣不僅要做到快速也必須保證準(zhǔn)確。如若加樣不準(zhǔn)確，酶生成物的量不能確定直接影響顯色結(jié)果。顯色的深淺及A值的測(cè)定與加入顯色劑和終止液的量有關(guān)，所以加樣需慎重。如果加樣遲緩會(huì)出現(xiàn)誤差，如果試劑長(zhǎng)時(shí)間暴露在外，尤其室溫過高時(shí)，保存期會(huì)縮短甚至失效。

　　7.嚴(yán)格掌握顯色時(shí)間，如若顯色時(shí)間過短加入終止液反應(yīng)終止后底物結(jié)合物的量過少，易出現(xiàn)假陰性。超過顯色要求時(shí)間后顯色，應(yīng)判為假陽性，這可能與試劑本身有關(guān)。加顯色劑后立即顯色，不可報(bào)陽性，這可能是本底顯色的結(jié)果。

　　8.洗滌一定要*，如果洗板不*，酶結(jié)合物本底顯色會(huì)呈現(xiàn)假陽性。另外需要注意洗滌液要新鮮，現(xiàn)用現(xiàn)配，陳舊的洗滌液會(huì)出現(xiàn)本底增高現(xiàn)象，也可能會(huì)出現(xiàn)假陽性。

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