產(chǎn)品僅供研究使用，不適用于人類或臨床診斷
商品屬性：

產(chǎn)品英文名稱：Human MIF Protein

產(chǎn)品中文名稱：重組人巨噬細(xì)胞遷移抑制因子（MIF）

規(guī)格：10 μg/50 μg/500 μg

貨號(hào)：EY-01X8659
用途：僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

特點(diǎn)&優(yōu)勢(shì):

標(biāo)簽:無標(biāo)簽

表達(dá)宿主:大腸桿菌

種屬:人

序列:氨基酸序列來源于：人源 MIF（Pro2-Ala115）表達(dá)的蛋白片段，N端含有一個(gè)Met和6xHis標(biāo)簽。

蛋白長(zhǎng)度：重組人MIF由115個(gè)氨基酸組成，與SDS-PAGE結(jié)果一致。

純度:> 98 % ，使用SDS-PAGE檢測(cè)

產(chǎn)品形式:凍干粉，凍干緩沖液為無菌的 PBS，pH 6.5。

基因ID:4282

使用中注意事項(xiàng):本產(chǎn)品為凍干粉形式，建議將凍干粉的γ，His標(biāo)簽（IFN-γ）產(chǎn)品保存于-20℃以下的干燥環(huán)境中。本產(chǎn)品溶解之后，可動(dòng)?動(dòng)

背景

巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(Macrophage Migration Inhibitory Factor, MIF)是一種多效的細(xì)胞因子，以同型三聚體的形式存在于體內(nèi)。MIF初被鑒定為抑制巨噬細(xì)胞遷移的T細(xì)胞衍生因子。近年來，MIF因其在血管生成和腫瘤發(fā)生發(fā)展中的可能作用而受到越來越多的關(guān)注。腫瘤內(nèi)MIF的表達(dá)與血管生成生長(zhǎng)因子如白細(xì)胞介素8 (IL-8)和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)的表達(dá)密切相關(guān)，并且與腫瘤切除術(shù)后復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)密切相關(guān)。

本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):

 1.操作簡(jiǎn)便、快捷?？芍苯蛹尤氲綑z測(cè)平板。在96-孔板中檢測(cè)時(shí),無需洗滌或收獲細(xì)胞,免去溶解步驟。

2. 無放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。

3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機(jī)溶劑來溶解甲臜產(chǎn)物。

4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進(jìn)一步生成。
公司正在出售的產(chǎn)品：

Bassoon(BSN 0.5mgBassoon(BSN)

CA5B Protein Human 重組人 Carbonic Anhydrase VB / CA5B 蛋白 (His 標(biāo)簽)

FKBP1A重組小鼠 FKBP12 / FKBP1A 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

CDH1 Protein Rat 重組大鼠 E-Cadherin / CDH1 / E-cad / CD324 蛋白

PTPRJ重組人 DEP1 / PTPRJ 蛋白 (aa 997-1337, His 標(biāo)簽) Protein

羊表皮生長(zhǎng)因子(EGF)ELISA 試劑盒

Human ai epidemic hemorrhagic fever virus IgM aibody (EHF) ELISA Kit 人抗流行性出血熱病毒抗體IgM (EHF)檢測(cè)試劑盒

Humanacetylcholine,ACHELISAKit 人乙酰(ACH)檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforADAM8(MouseADisiegrinAndMetalloprotease8)ELISAKIT小鼠解整合素樣金屬蛋白酶8

血液脂蛋白相關(guān)0脂酶A2(LPPLA2)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

Mousepulmonaryactivatioegulatedchemokine,PARCELISAKit小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)檢測(cè)試劑盒

乙酰轉(zhuǎn)移酶   英文名稱：   Rat acetylansferase   規(guī)格：      英文縮寫：   ChAT

大鼠降鈣素   英文名稱：   calcitonin   規(guī)格：      英文縮寫：   CAL

大鼠環(huán)0酸腺苷   英文名稱：   cyclic adenosine monophosphate   規(guī)格：      英文縮寫：   CAMP

大鼠環(huán)0酸鳥苷   英文名稱：   Cyclic guanosine monophosphate   規(guī)格：      英文縮寫：   cGMP

大鼠活化素B(ACV-B)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： ACV-B ELISA Kit

Rabbit cystatin / cystatin C (Cys-C) ELISA Kit 兔半胱蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)檢測(cè)試劑盒

桿菌(BA)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMousepulmonaryactivatioegulatedchemokine,PARCELISAKit小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子

體液元素比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

ELISAKitColⅣ人Ⅳ型膠原

重組人巨噬細(xì)胞遷移抑制因子（MIF）FKBP1A重組小鼠 FKBP12 / FKBP1A 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

Bassoon(BSN 0.5mgBassoon(BSN)

PTPRJ重組人 DEP1 / PTPRJ 蛋白 (aa 997-1337, His 標(biāo)簽) Protein

CA5B Protein Human 重組人 Carbonic Anhydrase VB / CA5B 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CDH1 Protein Rat 重組大鼠 E-Cadherin / CDH1 / E-cad / CD324 蛋白

操作步驟：

(一)獲得目的基因

1、通過PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計(jì)一對(duì)引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點(diǎn)),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。

2、通過RT-PCR方法:用TRIzol法從細(xì)胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進(jìn)行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。

(二)構(gòu)建重組表達(dá)載體

1、載體酶切:將表達(dá)質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點(diǎn))進(jìn)行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。

2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。

(三)  獲得含重組表達(dá)質(zhì)粒的表達(dá)菌種

1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標(biāo)志(抗Amp或藍(lán)白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。

2、 測(cè)序驗(yàn)證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進(jìn)入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆,重復(fù)亞克隆或亞克隆至不同酶切位點(diǎn)。

3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達(dá)宿主菌的感受態(tài)細(xì)胞。

(四)誘導(dǎo)表達(dá)

1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過夜培養(yǎng)。

2、按1∶50比例稀釋過夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。

3、取部分液體作為未誘導(dǎo)的對(duì)照組,余下的加入IPTG誘導(dǎo)劑至終濃度0.4mM作為實(shí)驗(yàn)組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。

4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。

5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。