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抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒包被液的選擇

時間：2017/11/7閱讀：2994

抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒一般選擇ph9.6的碳酸鹽緩沖液。但有時由于試驗的需要，包被原的特殊性也可能采用中性的緩沖溶液來包。應(yīng)注意：
由于蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團與固相載體表面的疏水基團間的作用，這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點、濃度等的影響，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團，故更易吸附到固相載體表面。具體的試驗還要有堅固的理論外也要實踐，看一下zui終可不可以應(yīng)用到自己試驗當(dāng)中去。常用的包被液除了剛才提到的pH9.6碳酸鹽緩沖液，還有pH7.2的磷酸鹽緩沖液和pH7-8的Tris-HCL緩沖液等等。
封閉
繼包被之后用高濃度的無關(guān)蛋白質(zhì)溶液再包被的過程。封閉就是讓大量不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些空隙，從而排斥ELISA后的步驟中干擾物質(zhì)的再吸附。
常用封閉劑有：0.05%-0.5%的BSA；10%的小牛血清或1%明膠；脫脂奶粉，比較價廉，可以高濃度使用（5%－10％）；還有一些稀有用到的各種動物血清和酪蛋白等等。但zui終選用什么，要依據(jù)試驗具體來實踐。

洗滌板
可以說在抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒操作中，洗滌是zui主要的關(guān)鍵技術(shù)。因為聚苯乙烯等塑料對蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的，為達到分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的，清除殘留在板孔中游離的物質(zhì)，以及非特異性地吸附的干擾物質(zhì)，在洗滌時又應(yīng)把這種非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來。所以在洗板時會有一定誤差，人為因素很大（當(dāng)然有條件的用洗板機除外），洗的不*或串了孔，對如此靈敏的ELISA系統(tǒng)可是不小的影響。
   STET 緩沖液   500ML   0   STET BUFFER
   SOUTHERN 試劑盒(含膜)   10 x 10 square cm   0   TOTAL BLOT SOUTHERN KIT W/ MEMBRANE
   SOUTHERN 試劑盒(不含膜)   1 Kit   0   TOTAL BLOT SOUTHERN KIT W/OUT MEMB.
   SOC 培養(yǎng)基   100ML   0   SOC MEDIA
   SOC 培養(yǎng)基   6x5ml   0   SOC MEDIA
   RNA貯存液   12x1ML   0   RIBORESERVE RNA STORAGE SOLUTION
   RNA貯存液   50ML   0   RIBORESERVE RNA STORAGE SOLUTION
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抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒

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抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒包被液的選擇

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