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小鼠白介素1β酶聯(lián)免疫分析試劑盒檢測原理

時間:2017/3/21閱讀:1016
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肺表面活性物質(zhì)相關蛋白CElisa試劑盒本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠白介素1β (IL-1β)水平。用純化的小鼠白介素1β (IL-1β)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入白介素1β(IL-1β),再與HRP 標記的白介素1β (IL-1β)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白介素1β (IL-1β)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),通過標準曲線計算樣品中小鼠白介素1β (IL-1β)濃度。

小鼠白介素-1β酶聯(lián)免疫試劑盒加強各個環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證,充分發(fā)揮其方法學的優(yōu)點,確保ELISA試驗結(jié)果。而本法不僅可以用來測定抗體,也可用于測定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。
小鼠白介素-1β酶聯(lián)免疫試劑盒在實驗過程中,能更有效的保持試劑穩(wěn)定,并且容易保存,其操作方法簡單,結(jié)果判定比同類產(chǎn)品更客觀更具優(yōu)勢。
肺表面活性物質(zhì)相關蛋白CElisa試劑盒關于樣本處理那些事:
(1)血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。
(2)血漿:小鼠白介素-1β酶聯(lián)免疫試劑盒應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
(3)尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。人組胺檢測試劑盒品牌通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(5)組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
(6)標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
(7)不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性肺表面活性物質(zhì)相關蛋白CElisa試劑盒。

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