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貨號(hào)	E-XB6230	規(guī)格	人
種屬	人	生長(zhǎng)特性	半貼半懸
細(xì)胞形態(tài)	上皮樣貼壁細(xì)胞，伴有圓形漂浮細(xì)胞

MIA-PACA-2人胰腺癌細(xì)胞細(xì)胞系

英文名稱	MIA-PACA-2	規(guī)格	1×106cells
種屬	人	生長(zhǎng)特性	半貼半懸
細(xì)胞形態(tài)	上皮樣貼壁細(xì)胞，伴有圓形漂浮細(xì)胞	貨號(hào)	E-XB6230
用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)	貨期	現(xiàn)貨

MIA-PACA-2人胰腺癌細(xì)胞細(xì)胞系

別稱 MIA-PaCa-2; MIA-PACA-2; MIA-Pa-Ca-2; MIA Paca2; MIA PaCa2; MiaPaCa-2; MIAPACA-2; MiaPaca.2; MiaPaCa2; Miapaca2; MIAPaCa2; MIAPACA2; Mia PACA 2; MIAPaCa-2; PaCa2

種屬人類

年齡（性別）男性，65歲

組織來(lái)源未知

生長(zhǎng)特性半貼半懸

細(xì)胞形態(tài) 上皮樣貼壁細(xì)胞，伴有圓形漂浮細(xì)胞

背景描述 The MIA PaCa-2 cell line was established by A. Yunis, et al. in 1975 from tumor tissue of the pancreas obtained from a 65-year-old Caucasian male.

生物安全等級(jí) 1

生長(zhǎng)培養(yǎng)基 DMEM＋10%FBS＋2.5%HS＋1%P/S

推薦傳代比例 1:3-1:8

推薦換液頻率 2~3次/周

倍增時(shí)間 ~26小時(shí) (PubMed=25984343); 25.7±4.3小時(shí) (PubMed=27067801); ~40小時(shí) (ATCC); ~30-40小時(shí) (DSMZ)

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

基因表達(dá)情況 human colony stimulating factor, subclass I (CSF-I); plasminogen activator

保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CRL-1420 DSMZ; ACC-733 ECACC; 85062806 JCRB; JCRB0070

MIA-PACA-2人胰腺癌細(xì)胞細(xì)胞系

1)復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10 cm皿中，加入約8 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02% EDTA)于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤(rùn)所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min(視細(xì)胞情況而定)，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml*培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。

c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

3)細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;

a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。

b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。

c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

MIA-PACA-2人胰腺癌細(xì)胞細(xì)胞系

豬內(nèi)皮細(xì)胞	大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞
小鼠小腸血管內(nèi)皮細(xì)胞	大鼠三叉神經(jīng)元細(xì)胞
大鼠胃黏膜上皮細(xì)胞	大鼠鼓膜上皮干細(xì)胞
兔角膜基質(zhì)細(xì)胞	小鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞
大鼠小腸血管內(nèi)皮細(xì)胞	小鼠頸動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞
兔臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞	小鼠胃平滑肌細(xì)胞
人結(jié)腸平滑肌細(xì)胞	小鼠腸神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞
小鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞	小鼠輸尿管成纖維細(xì)胞
大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞	小鼠海綿體平滑肌細(xì)胞
兔外周血巨噬細(xì)胞	小鼠zi宮微血管內(nèi)皮細(xì)胞
小鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞	小鼠脂肪干細(xì)胞
大鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞	小鼠單核細(xì)胞
兔軟骨細(xì)胞	MIA-PACA-2人胰腺癌細(xì)胞細(xì)胞系小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞
人小腸黏膜上皮細(xì)胞	小鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞
小鼠胃黏膜上皮細(xì)胞	小鼠視網(wǎng)膜微血管周細(xì)胞

MIA-PACA-2人胰腺癌細(xì)胞細(xì)胞系

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，干冰運(yùn)輸?shù)募?xì)胞檢查干冰是否*揮發(fā)，細(xì)胞是否解凍，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。.觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置2-4h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1：2傳代。

9. 注意： 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。