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阿利新藍染色液使用小竅門

時間:2022/11/4閱讀:819
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阿利新藍染色液使用小竅門


簡介:阿利新藍(Alcian)又稱愛先藍或阿爾辛藍等,是一種陽離子染料,染料與酸性基團形成鹽鍵。利用染料的不同pH及不同電解質(zhì)濃度,可區(qū)分酸性黏液物質(zhì)的類別。阿利新藍作為一種類銅鈦花青共軛染料,最初用于紡織纖維染色。這種陽離子染料與酸性基團結合,也即阿爾辛藍與組織內(nèi)含有的陰離子基團如羧基和硫酸根形成不溶性復合物。阿利新藍由中央含銅的酞菁環(huán)與四個異硫脲基通過硫醚鍵相連而成,該異硫脲基呈中度堿性,使阿利新藍帶陽離子。pH 值為2.5時,組織內(nèi)的羧基電離,帶有一個負電荷,與阿利新藍中的陽離子形成鹽鍵,使帶有羧基的酸性黏液物質(zhì)(硫酸黏蛋白和唾液黏蛋白)染色。


阿利新藍染色液(pH1.0)利用染液的不同 pH 值可區(qū)分粘液物質(zhì)的類屬,pH為1時,羧基(COOH)不著色,硫酸基(OSO3H)著色,pH為2.5時,羧基染色良好而硫酸粘液著色不佳。pH 值為 1.0 時,組織內(nèi)的硫酸根電離,帶有一個負電荷,與阿利新藍中的陽離子形成鹽鍵,使帶有硫酸根的組織(如硫酸黏液物質(zhì))染色。中性黏蛋白(如胃黏膜和 Brunner 腺體部位的中性黏蛋白)不能與阿利新藍反應。


保存條件:

室溫保存。


操作步驟(僅供參考):

1、二甲苯脫蠟,通過梯度乙醇后,入蒸餾水再水化。

2、Alcian酸化工作液浸泡5min。

3、Alcian染色液浸染30min。

4、流水沖洗。

5、Alcian酸化工作液稍洗。

6、不經(jīng)水洗,直接用濾紙吸干多余的Alcian酸化工作液。

7、核固紅染色液,復染,流水沖洗。

8、常規(guī)乙醇脫水,二甲苯透明,中性樹膠封片。


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