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閱讀:64發(fā)布時(shí)間:2015-12-15
今天是又是新的開(kāi)始,新的一周從解答客戶(hù)難題開(kāi)始。今天剛上班我司的王接到了浙一學(xué)院的王同學(xué)來(lái),他說(shuō):我做了十多次的Elisa,能夠得到線性比較好的標(biāo)準(zhǔn)曲線,但是同樣濃度的標(biāo)準(zhǔn)品每次的OD值都不一致,樣品就更加慘不忍睹了,除了酶標(biāo)板之外,其余封閉蛋白,抗體,抗體稀釋度,等等條件都已經(jīng)更換過(guò),但是問(wèn)題還是沒(méi)能解決,懷疑是酶標(biāo)板的問(wèn)題。求教高手,有什么方法可以快速驗(yàn)證酶標(biāo)板的可靠性。
王分析:elisa本身靈敏性很高,每次做出來(lái)的值不一樣很正常,特別是od值比較大的時(shí)候更是差別很大,但是只要不要偏差太大就好,一般偏差要求10%內(nèi)吧,好的數(shù)據(jù)是3%內(nèi)。首先要穩(wěn)定所有的條件,不同的條件下做的板子讀值不一樣很正常。在同樣條件下同批次的板子,如果測(cè)定不一樣,就是包被問(wèn)題或者保護(hù)劑的問(wèn)題,但這兩個(gè)都是各個(gè)試劑盒的機(jī)密,看看文獻(xiàn)里別人怎么做的。其次每次實(shí)驗(yàn)的標(biāo)曲上同一濃度樣品的OD值不一樣是很正常的,這與抗原抗體反應(yīng)體系、作用時(shí)間、顯色時(shí)間等等一系列的因素有關(guān)。鑒定該ELISA體系是否可靠,zui關(guān)鍵的指標(biāo)是加標(biāo)回收率和稀釋線性,如果你懷疑的話可以做一下。一般來(lái)說(shuō),國(guó)外廠商的ELISA試劑盒是沒(méi)有問(wèn)題的。同時(shí)你還要看一下說(shuō)明書(shū)中ELISA試劑盒的靈敏度,如果你的樣品濃度低于該檢測(cè)下限,則無(wú)法檢測(cè)到,這是很正常的現(xiàn)象,并不是非要每個(gè)樣品都要測(cè)出值才可以。
王同學(xué)非常感謝王的分析,他說(shuō)這次實(shí)驗(yàn)的試劑盒不是在你們公司買(mǎi)的,還有這么好的服務(wù)態(tài)度,下次如果還有需要沖你們的服務(wù)態(tài)度就在你們公司買(mǎi)了。我司主營(yíng)Elisa試劑盒,公司人才濟(jì)濟(jì),咨詢(xún)訂購(gòu)我司試劑盒。
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